哮喘患者外周血sPD-L2表达水平及其生物学和临床意义的研究

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【目的】应用自主研制的特异性检测人可溶性程序性死亡因子配体-2.(sPD-L2)的ELISA试剂盒定量分析检测sPD-L2在哮喘患者外周血中的表达特性,探讨:哮喘患者外周血sPD-L2的表达水平及其临床意义;哮喘患者外周血sPD-L2与白介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)水平及肺功能指标第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)及最大呼气流量占预计值百分比(PEF%)水平间的相关性。  【方法】采用免疫荧光标记和流式细胞仪检测术,检测了20例急性发作期哮喘患者和17例健康人外周血单个核细胞及其亚群的百分比以及协同刺激分子PD-1和PD-L2的表达;采用Western-blot定性检测哮喘患者外周血中sPD-L2的表达;采用sPD-L2ELISA试剂盒检测200例哮喘患者及110例健康人外周血中sPD-L2的表达水平;采用IL-4及IFN-γELISA试剂盒检测40哮喘患者及30例健康人外周血中细胞因子IL-4及IFN-γ的表达水平;采用肺功能仪测定200例哮喘患者FEV1%及PEF%的水平。  【结果】与对照组相比,急性发作期哮喘患者外周血CD4+/CD8+T细胞比例升高,CD14+PD-L2+单核细胞百分率增加,差别有统计学意义(P<0.05)。哮喘患者外周血中存在可溶性PD-L2表达。哮喘患者外周血中sPD-L2水平显著高于健康对照组(P<0.01),但与临床分期、控制水平、年龄、性别及有无过敏性鼻炎无相关性(p>0.05)。与对照组相比,哮喘患者外周血中IL-4的水平升高,而IFN-γ的水平则降低(p<0.05)。进一步分析发现哮喘患者sPD-L2的表达水平与IL-4、IFN-γ、FEV1%及PEF%之间没有相关性(p>0.05)。  【结论】哮喘患者外周血中异常高表达的功能性sPD-L2影响了膜型PD-1/PD-L2负性抑制作用,从而不能抑制T细胞的增殖和活化,引起相应的细胞因子分泌过多,可能是介导哮喘发生和发展的重要机制之一。
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