猪瘟是一种以严重出血为特征、高度接触感染性的动物疫病，能够导致猪群的大量发病和死亡，给养猪业造成严重的经济损失。E2囊膜糖蛋白是猪瘟病毒中相当重要的一个结构蛋白，其不仅参与了病毒的感染致病过程，还是病毒的主要保护性抗原，能够诱生特异性的中和抗体清除病毒。因此，对E2蛋白结构和功能的探索一直是猪瘟病毒研究的重点之一。　　 本文根据己发表猪瘟病毒兔化弱毒株的E2基因序列，设计引物利用RT-PCR方法扩增了E2基因的主要抗原结构域E2a，并将其克隆至pMD18-T载体，再亚克隆到原核表达载体pET-32a上，构建重组表达质粒pET-E2a。将pET-E2a转入大肠杆菌BL-21(DE3)与Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE与Western blot检测，证实为E2a重组融合蛋白。E2a重组蛋白在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达，而Rosetta(DE3)菌株中的蛋白表达量显著高于BL-21(DE3)菌株。所得包涵体溶解后经镍离子金属螯合亲和层析法进行纯化，纯化蛋白以逐步透析法进行复性重折叠，通过Westem blot实验证实复性蛋白可被猪瘟阳性血清识别，具备良好的抗原性。　　 以复性E2a重组蛋白制备抗原免疫动物，获取了多克隆抗体。免疫斑点实验测定抗体效价后，通过Western blot和间接免疫荧光实验证实针对E2a重组蛋白的多克隆抗体能够识别CSFV病毒粒子与感染细胞中天然构型的El/E2蛋白异源二聚体，具备良好的反应性与特异性。