本研究以昆明白小鼠胎儿为材料,从原始生殖细胞分离培养出EG 细胞,并进行传代培养和鉴定,对影响胚胎生殖细胞(Embryonic germ cell, EG)分离与培养的因素进行了探讨,为进一步建立昆明白小鼠EG 细胞系奠定了基础。主要实验结果如下: 1) 从8.5~12.5 dpc 的昆明白小鼠胎儿分离培养胎儿原始生殖细胞,最高传至9 代。2) 试验比较了不同分离方法对小鼠胎儿原始生殖细胞分离的影响,发现分次消化分离效果好于一次消化。3) 试验比较了不同传代方法对小鼠胚胎生殖细胞细胞传代的影响,发现“消化+机械离散法”,“消化+吹打法”和“消化+连续离散法”均可用于EG 细胞的传代。“消化+连续离散法”和“消化+吹打法”操作简单,省时省力,也能够很好的保持细胞的增殖活力。4) 试验以三种培养液培养小鼠PGCs,在原代培养时,都能克隆出EG 细胞集落,小鼠胎儿肝细胞条件培养液可以支持小鼠PGCs 的生长和增殖;而在传代过程中,以含LIF 1000 IU/mL 组培养效果最好,其次是小鼠胎儿肝细胞条件培养液,未添加细胞因子的EG 细胞培养液组效果较差。5) 试验发现添加17β-雌二醇对原代小鼠PGCs 的生长具有促进作用,获得的EG 细胞集落数目较多,形态较典型,传代效果也好于对照组。6) 试验对比不同胎儿性别对小鼠PGCs 分离培养的影响,发现两种性别的胎儿都可以克隆出EG 细胞集落,但原代雄性EG 细胞集落的克隆率较高;传代比较发现,雄性来源的EG 细胞集落更适合于传代培养。