植物组织培养和传统嫁接技术是茶树的两种主要繁殖方式,组培存在易污染、褐化、生根难的问题,传统嫁接易受季节温度和接穗数量的限制,而微嫁接是一种将植物组织培养与传统嫁接技术相结合的无性繁殖技术,因此可利用微嫁接技术同时解决上述两者存在的问题。本研究以早春新品种‘高原绿’为材料,通过组培获得接穗后,与砧木黔湄601嫁接,探索组培基本条件,探究影响茶树微嫁接成活因素,以及对酶活和氨基酸的影响,该技术可为茶树优良品种微嫁接工厂化育苗提供支持,为遗传转化奠定基础,为微嫁接对茶树生理生化影响研究提供参考。主要研究结果如下:1.以‘高原绿’带腋芽茎段为外植体,探索取样时期、消毒方式、植物生长调节剂对外植体腋芽萌发、增殖、壮苗的影响。结果为:茎段经75%酒精浸泡60s,0.1%升汞浸泡8min,28d后外植体存活率为91.11%,污染率为4.44%,褐化率为4.44%;3月底采取其成活率最高,5周时成活率为88.67%;腋芽萌发培养最适培养基为MS+2mg/L 6-BA+1mg/L GA3,40d其萌发率为81.11%,芽长均值为1.93cm,苗长势好;增殖培养最佳培养基为MS+4mg/L 6-BA+2m/L IBA,50d增值系数3.37,苗壮;之后壮苗培养得出最适培养基为MS+1mg/L 6-BA+0.5m/L IBA,50d苗高增加2.25cm。2.以‘高原绿’叶片和无腋芽茎段为外植体,探寻不同外植体类型、不同消毒时间、植物生长调节剂对其存活、愈伤诱导、诱导不定芽的影响。结果表明,叶片茎75%酒精浸泡30s,0.1%升汞浸泡6min,28d存活率为86.67%,污染率为9.33%,褐化率为4.67%;后将茎段和叶片接种于不同调节剂配比愈伤诱导培养基中,MS+0.5mg/L 6-BA+2mg/L 2,4-D或MS+1mg/L 2,4-D条件下,茎段和叶片30d都可100%出愈;继代一次之后转入诱导不定芽培养基中,茎段愈伤在MS+3mg/L 6-BA+2mg/L NAA条件下培养60d,13.33%诱导出芽,叶片无芽诱出。3.以‘高原绿’组培获得无根苗为接穗,扦插生根苗‘黔湄601’为砧木,进行微嫁接,选用劈接法,在25℃条件下培养,嫁接之前先将组培苗自然散射光下照射2d。研究了接穗带叶数、接穗打顶、接穗木质化程度、组培苗炼苗时间、生长调节物质浓度、接穗长度、组培苗茎杆与砧木苗茎杆大小关系等对微嫁接成活率的影响。结果表明,带3片叶的接穗易于嫁接成活;组培苗最适宜炼苗时间为4d;留顶的接穗嫁接后新芽萌发较快;出现木质化的接穗嫁接后可避免枯死;接穗长度为2.5±0.1cm、在1mg/L NAA中浸泡接穗5min后嫁接成活率最高;选择茎秆直径大小相近的砧木和接穗进行微嫁接成活率高。本研究条件下,茶树微嫁接最高成活率为68.33%。4.微嫁接成活后进行保护性酶和氨基酸测定,与未嫁接苗比,SOD、CAT、PAL的总体走势相同,先升高后降低,均在21d时达到最高,但PAL在7d时低于未嫁接;21d SOD为104.28 U·mgprot-1,CAT为686.00U·gprot-1,PAL为37.51U·gprot-1;检测微嫁接、未嫁接砧木、未嫁接接穗的17种氨基酸,结果显示微嫁接中共检测出16种游离氨基酸,总量为1201.95 mg/kg,其中茶氨酸473.56mg/kg;未嫁接砧木‘黔湄601’共检测出12种游离氨基酸,总量为369.67 mg/kg,其中茶氨酸36.62 mg/kg;未嫁接接穗‘高原绿’共检测出15种氨基酸,总量为1267.54 mg/kg,其中茶氨酸356.54 mg/kg。微嫁接苗茶氨酸高于未嫁接砧木和接穗,但苯丙氨酸均低于两者。