竹鼠肠道纤维素降解菌联合黑曲霉、粪肠球菌对辣木茎秆固态发酵及发酵条件的优化

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本试验利用刚果红培养基和羧甲基纤钠维素(CMC-Na)、微晶纤维素、D-水杨苷分别为唯一碳源的培养基对竹鼠肠道中的纤维素降解菌进行初筛,将初筛得到的菌株对其在不同培养条件下的产酶活性进行研究,选出一株酶活较高的纤维素降解菌与黑曲霉、粪肠球菌以单菌或混菌形式固态发酵辣木茎秆,以发酵后辣木茎秆中粗蛋白、粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗脂肪的含量为指标选出最佳发酵菌种组合,并用响应面法优化其发酵条件,来提高辣木茎秆的营养价值。结果表明:(1)从竹鼠肠道中共分离出11株菌,经刚果红培养基对其产降解菌初筛后,得到N1、N2、N3、N4、N5五株纤维素降解菌;对其测定酶活,N3菌产内切葡聚糖酶(Cen)、外切葡聚糖酶(Cex)、β-葡萄糖苷酶(BG)和滤纸酶(FPA)活性均显著大于N1、N2、N4、N5菌株(P﹤0.05),在不同培养条件下测定其五株菌的滤纸酶(FPA)活性,N3也优于N1、N2、N4、N5菌株;经鉴定,N3菌株为枯草芽孢杆菌。(2)发酵后,测得以枯草芽孢杆菌+黑曲霉+粪肠球菌形成的三菌组合T7组中粗蛋白和粗脂肪的含量显著高于对照组CK和单菌或双菌组中的T1、T2、T3、T5、T6组(P﹤0.05),与T4组比较差异不显著(P﹥0.05);T7组中粗纤维含量显著低于CK、T1、T2、T3、T5、T6组(P﹤0.05),与T4组比较差异不显著(P﹥0.05);T7组中酸性洗涤纤维含量显著低于CK、T1、T2、T3、T4、T5、T6组(P﹤0.05),中性洗涤纤维含量显著低于CK、T1、T2、T3组(P﹤0.05),和T4、T5、T6组比较,差异不显著(P﹥0.05)。(3)用响应面法优化辣木茎秆固态发酵条件,模型预测最佳发酵条件为含水量70%、发酵温度37.8摄氏度、接种量为14%、发酵时间为11.4天,在最优发酵条件下发酵后粗蛋白含量可提高到16.58%,粗纤维降低至35.28%,经验证试验检测后,该模型较为可靠。综上所述,从竹鼠肠道中分离出来纤维素降解菌效果最好的菌株是N3,鉴定后N3为枯草芽孢杆菌;对辣木茎秆固态发酵效果最好的菌种组合是由枯草芽孢杆菌+黑曲霉+粪肠球菌组成的三菌组合;经响应面法优化出最佳发酵条件为含水量70%、发酵温度37.8摄氏度、接种量为14%、发酵时间为11.4天。
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