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结直肠癌的发病率位居世界第三位,病死率为第四位。在结直肠癌的发生发展过程中,Ras信号通路发挥重要的作用。其中,作为最早发现的一种Ras蛋白GTP酶活化蛋白(GTPase activating protein, GAP), RASA1能激活Ras蛋白GTPase活性,使Ras蛋白从活化态转换为失活态,导致Ras信号通路受到抑制并最终影响细胞增殖和迁移等过程。微小核糖核酸(microRNA)作为一类新发现的调控因子,在多种癌症中起重要调控作用。本文深入研究微小核糖核酸对于Ras信号通路中重要调控因子RASA1的调控作用。本论文首先通过生物芯片和qRT-PCR技术建立人结直肠癌的microRNA差异表达谱,然后联合应用生物信息学软件并结合文献报道,初步筛选出靶向RASA1的microRNA,主要有microRNA-31, microRNA-335, microRNA-24-1, microRNA-132和microRNA-223五种。随后在扩大的8例人结直肠癌组织样本中通过qRT-PCR技术对上述5种microRNA进行再次筛选和验证,发现microRNA-223在这8例随机的人结直肠癌样本中变化趋势非常明显,平均上升倍数达5.75倍；之后在新的12例样本中通过qRT-PCR和western blot等技术,进一步验证microRNA-223和RASA1的负相关性。为了深入探究microRNA-223在结直肠癌的发生发展过程中对RASA1的分子调控机制,本论文在结直肠癌细胞中过表达和干扰抑制microRNA-223,检测RASA1的mRNA和蛋白水平变化；接着构建载体在体外做luciferase实验证实microRNA-223可以直接结合到RASA1的3’-UTR的种子序列上。这些实验证明RASA1是miR-223的作用靶点,miR-223能负调控抑癌基因RASA1的表达。之后进一步研究microRNA-223靶向RASA1所造成的生物学效应和分子功能,发现]microRNA-223表达水平的增加会激活Ras信号通路的下游蛋白,包括Ras、Mek、Erk等,进而会促进癌细胞的异常增殖和迁移。总之,microRNA-223通过靶向结直肠癌Ras信号通路中关键基因RASA1,能够调控Ras信号途径,在结直肠癌细胞的增殖和迁移过程中发挥重要的作用。