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目的:利用基因芯片技术对α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,α1,2-FT)基因转染后人卵巢癌细胞RMG-1-H和空载体处理的相同细胞RMG-1-C的mRNA进行检测,分析其基因表达的差异,探讨转染α1,2-FT对卵巢癌细胞系RMG-1癌相关基因的影响。
方法:
利用一步法提取卵巢癌细胞RMG-1-H及RMG-1-C总RNA并制备cDNA,合成生物素标记的cRNA探针,对两种样品进行荧光交换,分别与人肿瘤相关寡核苷酸基因芯片进行杂交,经洗片后用LuxScan 10KA双通道激光扫描仪扫描芯片荧光信号图像,用GenePix Pro 4.0图像分析软件对扫描图像进行数字化处理,在GoMiner在线数据库进行信息查询。
结果:
细胞系RMG-1-H有88种差异性表达基因,其中60种基因表达增强,28种基因表达降低。对其进行基因功能的检索,发现在分子功能、生物学行为和细胞成分定位三个分支上,转染α1,2-FT基因后RMG-1-H在蛋白质结合、核苷酸结合,细胞增值、DNA依赖性转录的调节、信号转导、蛋白氨基酸磷酸化、转录、细胞黏附等方面表现出了比较明显的改变,并推测α1,2-FT基因转染主要在细胞核水平影响着卵巢癌细胞的生物学行为。
结论:
转染α1,2-FT基因使卵巢癌细胞系RMG-1-H蛋白质结合、核苷酸结合,细胞增值、DNA依赖性转录的调节、信号转导、蛋白氨基酸磷酸化、转录、细胞黏附等方面在RNA水平上调,为进一步研究α1,2-FT与卵巢癌发生、发展的关系打下了基础。