【摘 要】
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目的 伏马菌素(fumonisin,FB)是一组镰刀菌产生的真菌毒素,其中FB1是污染玉米的主要成分,也是导致毒性作用的主要原因。FB1广泛存在于世界范围的玉米及其制品中,对人类健康
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目的 伏马菌素(fumonisin,FB)是一组镰刀菌产生的真菌毒素,其中FB1是污染玉米的主要成分,也是导致毒性作用的主要原因。FB1广泛存在于世界范围的玉米及其制品中,对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁。研究证明FB1可引起马的脑白质软化病(equine leukoencephalomalacia,ELEM)和猪的肺水肿综合征(porcine pulmonary edema,PPE)。流行病学资料显示,人类膳食中FB1污染与食管癌高发有一定的关联。 用于分析食品中的FB的各种仪器方法虽具较高的灵敏度和特异性,但多费时费力,不易推广使用。而应用单克隆抗体的ELISA检测方法,则具备简单、快速、灵敏,可同时检测大量样品的优点,受到各国学者的重视。国外报道有抗FB1的ELISA试剂盒,但价格昂贵。建立抗FB1单克隆抗体杂交瘤细胞株并研制具有我国自主知识产权的ELISA试剂盒具有重要意义,可为我国进行玉米及玉米制品中FB1的污染情况调查及制定国标FB1建议值等作技术支持。 方法 1 抗FB1单克隆抗体的制备 用戊二醛一步法制备人工抗原(FB1-KLH、FB1-BSA),用FB1-KLH免疫小鼠,免疫小鼠脾细胞与SP2/O细胞融合。以FB1-BSA为包被抗原,对细胞培养上清采用间接非竞争ELISA法筛选细胞孔。采用培养瓶内准确计数稀释法克隆杂交瘤细胞。采用动物体内诱生单克隆抗体的方法生产单克隆抗体。抗体的免疫球蛋白类别及亚类鉴定采用抗体亚类测定试剂盒。抗体蛋白含量采用BCA蛋白分析试剂盒进行测定。抗体分子量采用SDS-聚
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