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芽胞杆菌为革兰氏阳性细菌,在自然界分布十分广泛。由于具有营养需求简单、生长速度快、在植物叶片、根茎表面和组织内部都易于存活与繁殖、对人畜无害、对环境无污染、不会产生抗药性等特点,以及能够产生对外界恶劣的环境条件有强抵抗能力的芽胞而应用广泛。芽胞杆菌可产生丰富的代谢产物、抑菌能力强、可促进植物生长抑制病害发生。芽胞杆菌对紫外辐射、温度等环境的适应能力是其发挥生防功能的基础。本实验室此前从青藏高原不同生境鉴定和选出44株生防效果优异的芽胞杆菌。本研究将对此44株芽胞杆菌的耐紫外、耐高温和耐盐能力,及其低温条件下对冬小麦的促生能力进行了测定。
首先,我们对44株芽胞杆菌的高温耐受性进行了测定,分别测定其在37℃、45℃、50℃、55℃、60℃条件下的生长情况。在温度为37℃时,所有菌株可正常生长;在温度为45℃时,菌株NMSX4、SYST2、CKL1、GBSC56、LSSC3等39株芽胞杆菌可正常生长;在温度为50℃时,菌株TS1、LNXM37、SYST2、DGL6、LDZX38等33株芽胞杆菌可正常生长;温度为55℃时,菌株SYST2、LNXM70、GBSW22、CJCL2、GBSW19等15株芽胞杆菌可正常生长;温度为60℃时,只有4株芽胞杆菌(NMSX4、SYST2、NMSW12、GBSW22)可以缓慢生长,对高温具有较好的耐受性。然后进行了44株芽胞杆菌对盐的耐受性测定,测定其在盐浓度分别为3%、5%、7%、9%、11%、13%、15%、16%、17%的液体培养基环境中的生长情况。在盐浓度为16%时,仅有6个菌株CKL1、GBSW2、GBSC66、NMTD17、MZGC1、LNXM65可以缓慢生长,对照菌株FZB42和168最高只能在13%的盐浓度下缓慢生长。最后进行了芽胞杆菌耐紫外能力测定。在UV-C紫外灯(λ=253.7,功率=18w)下60cm处照射,分别照射20min、40min和60min。经紫外照射20min菌株存活率都在90%以上;紫外照射40min菌株存活率都在80%以上;紫外照射60min,只有3株芽胞杆菌(NMSL88、LNXM70、NMSW23)的存活率在80%以上,而对照菌株FZB42的存活率为1%,168的存活率仅为0.1%,结果表明3株芽胞杆菌(NMSL88、LNXM70、NMSW23)具有很强的抗紫外辐射能力。
在低温条件下(10℃),我们研究了这44株低温适生芽胞杆菌对冬小麦的促生能力,测定小麦的株高、根长、地上部鲜重和地下部鲜重。在10℃低温条件下,与FZB42和168相比较,菌株GBSW11、GBSC29、GBSW22、NMSW16、LDZX38、GBAC46、LSSC3、GBSC56、LNXM37、CKL1、LNXM78处理的小麦株高分别增加了97%、50%、65%、67%、45%、42%、78%、107%、55%、53%、55%;菌株GBSW11、NMSW23、LDZX38、GBSC56、LNXM37、NMTD54、YBWC18、DGL6、LNXM12、GBSC66、GBSC45、CKL1、SYST2、CJCL2处理的小麦根长分别增加了104%、44%、112%、92%、80%、42%、40%、96%、76%、42%、42%、41%、72%、42%;菌株LDZX38和GBSW22处理的小麦地上部鲜重分别增加了68%和49%;菌株LDZX38和GBSC29处理的小麦地下部鲜重增加了78%和53%。
桃子是重要的日常水果,在南北方均有大规模种植,桃褐腐病在果实储藏期造成腐烂,严重影响桃子的储藏时间和品质。前期本实验室研究发现,CO6能够有效预防由病原菌Moniliniafructicola引起的桃褐腐病,对采后水果具有很强的保鲜能力。本实验我们首先从南京地区腐烂的桃果实上分离鉴定出两种病原真菌Moniliniafructicola和Gilbertellapersicaria。之后,测定了生防菌解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CO6和FZB42、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SYST2、多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)E681、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)Pf-5,对由病原菌Moniliniafructicola引起的桃褐腐病的防治效果。分别用这5株芽胞杆菌发酵液(浓度1.0×107cfu·ml-1)和对照化学药剂多菌灵处理桃果实,对其发病率和防治效果进行统计。结果表明,CO6防治效果最好,防效为75.06%,与化学药剂多菌灵无显著差异。菌株E681、FZB42、SYST2、Pf-5的的防治效果分别为55.19%、68.09%、10.46%、47.72%,表明CO6、E681和FZB42均具有较好的防治效果,可用于防治桃褐腐病。
本文还研究了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SYST2制剂(商品名为播可润)对草莓品质的影响。实验使用的播可润C918、C576、C917微生物制剂由沈阳爱地生物科技有限公司生产,使用方法为冲施C918(2.5L/亩)然后底施C576(20kg/亩)最后叶喷C917(70mL/15kg水)。在果实成熟期对草莓的可溶性糖、有机酸等生理指标进行了测定,结果发现,施用播可润比对照组可溶性糖含量增加了0.54%,有机酸含量减少0.04%,同时糖酸比增加了15.93%,Vc含量增加2.00%。微生物菌剂还可以显著降低果实中硝酸盐的含量,其中施用组硝酸盐含量比对照组减少54.99%。
首先,我们对44株芽胞杆菌的高温耐受性进行了测定,分别测定其在37℃、45℃、50℃、55℃、60℃条件下的生长情况。在温度为37℃时,所有菌株可正常生长;在温度为45℃时,菌株NMSX4、SYST2、CKL1、GBSC56、LSSC3等39株芽胞杆菌可正常生长;在温度为50℃时,菌株TS1、LNXM37、SYST2、DGL6、LDZX38等33株芽胞杆菌可正常生长;温度为55℃时,菌株SYST2、LNXM70、GBSW22、CJCL2、GBSW19等15株芽胞杆菌可正常生长;温度为60℃时,只有4株芽胞杆菌(NMSX4、SYST2、NMSW12、GBSW22)可以缓慢生长,对高温具有较好的耐受性。然后进行了44株芽胞杆菌对盐的耐受性测定,测定其在盐浓度分别为3%、5%、7%、9%、11%、13%、15%、16%、17%的液体培养基环境中的生长情况。在盐浓度为16%时,仅有6个菌株CKL1、GBSW2、GBSC66、NMTD17、MZGC1、LNXM65可以缓慢生长,对照菌株FZB42和168最高只能在13%的盐浓度下缓慢生长。最后进行了芽胞杆菌耐紫外能力测定。在UV-C紫外灯(λ=253.7,功率=18w)下60cm处照射,分别照射20min、40min和60min。经紫外照射20min菌株存活率都在90%以上;紫外照射40min菌株存活率都在80%以上;紫外照射60min,只有3株芽胞杆菌(NMSL88、LNXM70、NMSW23)的存活率在80%以上,而对照菌株FZB42的存活率为1%,168的存活率仅为0.1%,结果表明3株芽胞杆菌(NMSL88、LNXM70、NMSW23)具有很强的抗紫外辐射能力。
在低温条件下(10℃),我们研究了这44株低温适生芽胞杆菌对冬小麦的促生能力,测定小麦的株高、根长、地上部鲜重和地下部鲜重。在10℃低温条件下,与FZB42和168相比较,菌株GBSW11、GBSC29、GBSW22、NMSW16、LDZX38、GBAC46、LSSC3、GBSC56、LNXM37、CKL1、LNXM78处理的小麦株高分别增加了97%、50%、65%、67%、45%、42%、78%、107%、55%、53%、55%;菌株GBSW11、NMSW23、LDZX38、GBSC56、LNXM37、NMTD54、YBWC18、DGL6、LNXM12、GBSC66、GBSC45、CKL1、SYST2、CJCL2处理的小麦根长分别增加了104%、44%、112%、92%、80%、42%、40%、96%、76%、42%、42%、41%、72%、42%;菌株LDZX38和GBSW22处理的小麦地上部鲜重分别增加了68%和49%;菌株LDZX38和GBSC29处理的小麦地下部鲜重增加了78%和53%。
桃子是重要的日常水果,在南北方均有大规模种植,桃褐腐病在果实储藏期造成腐烂,严重影响桃子的储藏时间和品质。前期本实验室研究发现,CO6能够有效预防由病原菌Moniliniafructicola引起的桃褐腐病,对采后水果具有很强的保鲜能力。本实验我们首先从南京地区腐烂的桃果实上分离鉴定出两种病原真菌Moniliniafructicola和Gilbertellapersicaria。之后,测定了生防菌解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CO6和FZB42、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SYST2、多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)E681、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)Pf-5,对由病原菌Moniliniafructicola引起的桃褐腐病的防治效果。分别用这5株芽胞杆菌发酵液(浓度1.0×107cfu·ml-1)和对照化学药剂多菌灵处理桃果实,对其发病率和防治效果进行统计。结果表明,CO6防治效果最好,防效为75.06%,与化学药剂多菌灵无显著差异。菌株E681、FZB42、SYST2、Pf-5的的防治效果分别为55.19%、68.09%、10.46%、47.72%,表明CO6、E681和FZB42均具有较好的防治效果,可用于防治桃褐腐病。
本文还研究了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)SYST2制剂(商品名为播可润)对草莓品质的影响。实验使用的播可润C918、C576、C917微生物制剂由沈阳爱地生物科技有限公司生产,使用方法为冲施C918(2.5L/亩)然后底施C576(20kg/亩)最后叶喷C917(70mL/15kg水)。在果实成熟期对草莓的可溶性糖、有机酸等生理指标进行了测定,结果发现,施用播可润比对照组可溶性糖含量增加了0.54%,有机酸含量减少0.04%,同时糖酸比增加了15.93%,Vc含量增加2.00%。微生物菌剂还可以显著降低果实中硝酸盐的含量,其中施用组硝酸盐含量比对照组减少54.99%。