研究背景近年来随着乳腺癌分子分型的发展,对乳腺癌基因组有了更深入的认识,目前认为乳腺癌是具有高度内部异质性的,由多种亚型组成的一类疾病。三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)因其侵袭性强,复发、转移发生率高,发生复发转移后治疗效果差,被认为是一类具有特殊表型的乳腺癌亚型,一直以来受到广泛关注与研究。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)是一种非组蛋白染色体核蛋白,可以与DNA结合组成核蛋白复合体,在基因表达调控方面发挥重要作用。HMGB1在乳腺癌组织中表达水平要高于正常组织,而且高表达于临床分期晚、组织学分级高、伴有淋巴结转移及远处转移者,提示HMGB1在乳腺癌的侵袭和转移的生物学行为中,可能具有重要的作用。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)在人类上皮细胞和免疫细胞中均有表达,具有高度稳定的分子结构,是重要的模式识别受体。TLRs能够通过识别、结合不同的病原相关分子模式,感知病原菌的入侵,激活一系列细胞信号转导,释放炎症介质,从而在机体的天然免疫及激活获得性免疫防御过程中发挥重要作用。TLR4是重要的TLRs成员之一,在促进肿瘤免疫逃逸、肿瘤细胞增殖和抗调亡、增强肿瘤细胞侵袭性等方面发挥着重要的作用。TLR4是乳腺癌组织中主要的TLR亚型,而且TLR4表达阳性的乳腺癌患者的总生存率和无病生存率都明显低于TLR4蛋白表达阴性的乳腺癌患者,预示了TLR4的表达情况可能与乳腺癌的侵袭转移具有密切的关联。乳腺癌的流行病学研究由来已久,可是多数是把乳腺癌看作一种疾病来分析其发病风险,没有考虑到乳腺癌的不同亚型其发病风险可能有所不同。不同的乳腺癌分子分型具有其不同的高发年龄段,不同亚型之间乳腺癌风险因素有显著差异,预示了TNBC可能具有与其它亚型不同的流行病学特征。目的1、实验研究:通过实验研究探讨HMGB1和TLR4在TNBC与非TNBC组织中的表达水平的差异,进一步分析其与TNBC临床病理特征及预后的相关性。2、流行病学调查:通过流行病学调查,探讨TNBC发病的主要危险因素,为TNBC发病危险性评估及降低发病危险提供依据。方法1、实验研究部分,收集2011年01月~2013年12月福建医科大学附属第一医院术前未经新辅助治疗并经手术切除病理诊断为TNBC的患者作为实验组,按1:2随机配对收集同期的非TNBC患者作为对照组;通过免疫组织化学染色的方法,检测实验组与对照组组织石蜡标本中HMGB1、TLR4的表达情况,并通过统计学方法分析其表达差异与临床病理特征的相关性。2、流行病学调查部分,收集2017年01月~06月新发的浸润性乳腺癌患者做为研究组,按免疫组化结果分为TNBC组和非TNBC组,按1:2配对收集同期门诊健康体检的正常人群作为对照组,收集研究组和对照组的乳腺癌危险因素相关信息,并对危险因素进行条件Logistic回归分析。结果1、TNBC组中HMGB1和TLR4的阳性表达率均明显高于非TNBC组(81.4%VS 64%;69.8%VS 51.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。2、HMGB1/TLR4在TNBC组中表达情况与临床病理学的关系:组织学分级高、伴有淋巴结转移、Ki-67高表达等与HMGB1/TLR4的阳性程度呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);在术后复发转移方面,DFS≤36个月者阳性率为94.4%,DFS>36个月者阳性率为80%,差异有统计学意义(P<0.05)。3、单因素条件Logistic回归分析显示与TNBC危险因素呈正相关的变量有:高BMI、初潮年龄早、雌激素替代治疗、负性事件、工作压力、心理疾病、乳腺癌家族史;而哺乳时间长、锻炼频度>3次/周则是负相关变量。多因素条件Logistic回归分析发现TNBC的独立危险因素有:雌激素替代治疗、高BMI、负性事件、心理性疾病、乳腺癌家族史;哺乳时间≥12个月、锻炼频度>3次/周是TNBC的独立保护因素。结论1、HMGB1/TLR4的高表达与TNBC的高侵袭特征相关。HMGB1/TLR4高表达的TNBC患者具有组织学分级较高、常伴有淋巴结转移、高Ki-67表达等临床特征,并具有较差的临床预后。2、TNBC的危险因素中,雌激素替代治疗、高BMI、负性事件、心理性疾病、乳腺癌家族史是其独立危险因素;哺乳时间≥12个月、锻炼频度>3次/周则是TNBC的独立保护因素。