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目的:沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）依赖的III类组蛋白脱乙酰化酶。大量研究表明SIRT1在多种肿瘤中呈高表达水平,参与肿瘤的发生发展,且与肿瘤的预后和耐药密切相关。本研究应用靶向SIRT1的小干扰RNA沉默SIRT1的表达,在细胞水平研究SIRT1对宫颈癌SiHa细胞及C33A细胞增殖及细胞周期的影响,在此基础上将siRNA-SIRT1与顺铂联合作用于SiHa细胞及C33A细胞,检测SIRT1对宫颈癌细胞耐药性及相关耐药基因的影响,探讨其作用的分子机制。方法:化学合成靶向SIRT1的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）及其阴性对照序列,应用Lipofectamine RNAi MAX脂质体分别转染宫颈癌SiHa细胞及C33A细胞。实验分为三组:空白细胞对照组、阴性siRNA对照组和siRNA-SIRT1转染组。转染后72h,提取各组细胞总RNA和总蛋白。RT-PCR检测细胞SIRT1 mRNA的表达;Western blot检测细胞SIRT1蛋白的表达。CCK-8法测定各组细胞的增殖及其IC50;RT-PCR、qRT-PCR及Western blot检测不同分组的SiHa细胞及C33A细胞ABCC1的表达;流式细胞术检测SiHa细胞及C33A细胞周期变化;Western blot检测SiHa细胞及C33A细胞耐药相关基因PARP-1及DNA-PKcs蛋白的表达水平。结果:RT-PCR及Western blot结果显示:与空白细胞对照组相比,siRNA-SIRT1组SIRT1 mRNA及蛋白的表达明显下调（P<0.05）;CCK-8结果显示:顺铂对SiHa细胞的IC50值分别为11.16μM（24h）和5.11μM（48h）,与空白SiHa细胞组相比,siRNA-SIRT1与顺铂联合作用组SiHa细胞增殖抑制率为60%,差异具有统计学意义（P<0.05）;顺铂对C33A细胞的IC50值分别3.01μM（24h）和1.05μM（48h）,与空白C33A细胞组相比,siRNA-SIRT1与顺铂联合作用组C33A细胞的增殖抑制率为45%（P<0.05）。RT-PCR和qRT-PCR结果均显示:与空白细胞对照组相比,siRNA-SIRT1转染组ABCC1 mRNA的表达明显下调（P<0.05）。Western blot结果显示:与空白细胞对照组相比,siRNA-SIRT1组ABCC1蛋白的表达明显下调（P<0.05）,而PARP-1及DNA-PKcs蛋白表达显著上调（P<0.05）。细胞周期结果显示:与空白SiHa细胞对照组相比,siRNA-SIRT1转染组及siRNA-SIRT1与顺铂联合作用组SiHa细胞出现明显S期阻滞（P<0.05）;与空白C33A细胞对照组相比,siRNA-SIRT1转染组C33A细胞出现明显S期及G2期阻滞（P<0.05）,siRNA-SIRT1和顺铂联合作用组C33A细胞中出现明显G1期阻滞（P<0.05）。结论:siRNA-SIRT1不仅能抑制SiHa细胞及C33A细胞的增殖,而且可引起细胞周期阻滞,激活DNA损伤修复通路,下调耐药基因ABCC1的表达,同时上调PARP-1及DNA-PKcs DNA损伤修复蛋白的表达,以提高SiHa细胞及C33A细胞对顺铂药物的敏感性,SIRT1有望成为宫颈癌治疗的潜在靶点。