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【目的】
1.设计和合成线性多肽抗原。
2.检测Ⅱ型糖尿病(type 2 diabetes，T2D)患者和健康对照者的天然抗体。
3.探讨天然抗体与T2D的关系，为T2D发生机制的研究提供有价值的实验资料。
【方法】
1.设计和合成线性多肽抗原：在查阅文献的基础上，从NCBI蛋白质数据库中检索IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、CD25和FOXP3七个蛋白质的序列信息，根据人类白细胞抗原-Ⅱ类表位和B细胞表位的信息，再结合蛋白质的亲水性、柔韧性、表面可及性和抗原性进行分析，然后选出综合评分靠前的10个线性多肽抗原，最后将这10个线性多肽抗原序列送交上海吉尔生化有限公司用固相化学法合成线性多肽抗原。
2.酶联免疫吸附测定方法的应用：利用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法，检测200例中国汉族人首次确诊为T2D患者和220例健康对照者的血浆中与线性多肽抗原对应的天然抗体；使用人总IgG抗体检测试剂盒检测T2D患者和健康对照者的总IgG抗体。
3.数据分析：用特异性结合率(specific binding ratio，SBR)表示血浆天然抗体水平。用SPSS23.0软件分析T2D患者与健康对照者天然抗体水平的差异和每个天然抗体与总IgG抗体水平的相关性以及炎性细胞因子天然抗体水平与降糖治疗效果的关系。用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC)分析曲线下面积(area under curve，AUC)和特异性为90%的灵敏度。
【结果】
1.设计和合成出10个线性多肽抗原，包括5个与炎性细胞因子相关的线性多肽抗原，分别为IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α；5个与CD25、FOXP3相关的线性多肽抗原，分别为CD25a、CD25b、CD25c、FOXP3a、FOXP3b。
2.T2D患者和T2D男性患者IL-8、CD25a的天然抗体水平分别明显低于健康对照者和健康男性对照者，差异有统计学意义(P＜0.01)。T2D女性患者IL-8、CD25a的天然抗体水平低于健康女性对照者，但差异无统计学意义(P＞0.01)。T2D患者、T2D男性患者和T2D女性患者IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、CD25b、CD25c、FOXP3a和FOXP3b的天然抗体水平分别与健康对照者、健康男性对照者和健康女性对照者比较，差异无统计学意义(P＞0.01)。
3.T2D患者IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的天然抗体水平与3个月或6个月的降糖治疗效果均未见相关性(P＞0.01)。
4.ROC曲线分析：用10个线性多肽抗原检测相应天然抗体的曲线下面积的范围为0.511~0.597，特异性为90%的灵敏度范围为9.5%~19.5%。
5.T2D患者的总IgG抗体水平低于健康对照者，但差异无统计学意义(P＞0.01)。T2D患者和健康对照者的炎性细胞因子、CD25和FOXP3天然抗体与总IgG抗体均未见相关性(P＞0.01)。
【结论】
1.设计和合成了IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、CD25a、CD25b、CD25c、FOXP3a、FOXP3b10个线性多肽抗原。
2.IL-8和CD25天然抗体的减少可能与T2D的发生有关。
1.设计和合成线性多肽抗原。
2.检测Ⅱ型糖尿病(type 2 diabetes，T2D)患者和健康对照者的天然抗体。
3.探讨天然抗体与T2D的关系，为T2D发生机制的研究提供有价值的实验资料。
【方法】
1.设计和合成线性多肽抗原：在查阅文献的基础上，从NCBI蛋白质数据库中检索IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、CD25和FOXP3七个蛋白质的序列信息，根据人类白细胞抗原-Ⅱ类表位和B细胞表位的信息，再结合蛋白质的亲水性、柔韧性、表面可及性和抗原性进行分析，然后选出综合评分靠前的10个线性多肽抗原，最后将这10个线性多肽抗原序列送交上海吉尔生化有限公司用固相化学法合成线性多肽抗原。
2.酶联免疫吸附测定方法的应用：利用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)方法，检测200例中国汉族人首次确诊为T2D患者和220例健康对照者的血浆中与线性多肽抗原对应的天然抗体；使用人总IgG抗体检测试剂盒检测T2D患者和健康对照者的总IgG抗体。
3.数据分析：用特异性结合率(specific binding ratio，SBR)表示血浆天然抗体水平。用SPSS23.0软件分析T2D患者与健康对照者天然抗体水平的差异和每个天然抗体与总IgG抗体水平的相关性以及炎性细胞因子天然抗体水平与降糖治疗效果的关系。用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC)分析曲线下面积(area under curve，AUC)和特异性为90%的灵敏度。
【结果】
1.设计和合成出10个线性多肽抗原，包括5个与炎性细胞因子相关的线性多肽抗原，分别为IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α；5个与CD25、FOXP3相关的线性多肽抗原，分别为CD25a、CD25b、CD25c、FOXP3a、FOXP3b。
2.T2D患者和T2D男性患者IL-8、CD25a的天然抗体水平分别明显低于健康对照者和健康男性对照者，差异有统计学意义(P＜0.01)。T2D女性患者IL-8、CD25a的天然抗体水平低于健康女性对照者，但差异无统计学意义(P＞0.01)。T2D患者、T2D男性患者和T2D女性患者IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α、CD25b、CD25c、FOXP3a和FOXP3b的天然抗体水平分别与健康对照者、健康男性对照者和健康女性对照者比较，差异无统计学意义(P＞0.01)。
3.T2D患者IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的天然抗体水平与3个月或6个月的降糖治疗效果均未见相关性(P＞0.01)。
4.ROC曲线分析：用10个线性多肽抗原检测相应天然抗体的曲线下面积的范围为0.511~0.597，特异性为90%的灵敏度范围为9.5%~19.5%。
5.T2D患者的总IgG抗体水平低于健康对照者，但差异无统计学意义(P＞0.01)。T2D患者和健康对照者的炎性细胞因子、CD25和FOXP3天然抗体与总IgG抗体均未见相关性(P＞0.01)。
【结论】
1.设计和合成了IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、CD25a、CD25b、CD25c、FOXP3a、FOXP3b10个线性多肽抗原。
2.IL-8和CD25天然抗体的减少可能与T2D的发生有关。