一株刺盘孢属内生真菌(HCCB03289)的分离及其代谢产物研究

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植物内生真菌可产生骨架新颖、生物活性多样的次级代谢产物,已成为人们寻找天然产物的热点,是发现新的先导化合物的重要来源之一。本论文采用表面消毒法分离了61种植物的内生真菌,获得纯化菌株304株;通过比较3株不同产地北细辛的优势内生真菌,发现同一品种不同产地的植株,其内生真菌的种类和数量存在差异;筛选了134株内生真菌代谢产物的抗菌和抗肿瘤活性,获得抗肿瘤活性菌株126株,抗菌活性菌株12株;对1株丁香蓼来源的、具有抗肿瘤活性的内生真菌HCCB03289菌株进行形态特征和18SrDNA序列相似性分析,该菌株归属为刺盘孢属;对HCCB03289的发酵产物进行溶剂萃取、减压硅胶柱层析、凝胶柱层析和HPLC制备,获得12个化合物。经质谱、13C-NMR、1H-NMR、HSQC、HMBC、COSY、NOESY等相关波谱分析鉴定为7个吡喃酮类化合物,2个甾体类化合物,1个异香豆素类化合物,以及吲哚乙酸和苯乙酸。化合物Pyrenocine A, Pyrenocine B, Pyrenocine E,Pyrenocine G, Macommelino-acetate(Pyrenocine L), (2α,3β)-3-羟基-2,5-二甲基-3,4-二氢吡喃-7-酮(Pyrenocine M), (2β,3α)-3-羟基-2,5-二甲基-3,4-二氢吡喃-7-酮(Pyrenocine N), 6-Hydroxymellein和Cyathisterol均为首次从刺盘孢属中分离获得,其中Pyrenocine L, Pyrenocine M, Pyrenocine N为吡喃酮类新化合物;对Pyrenocine A, Pyrenocine B, Pyrenocine E,Pyrenocine G, Pyrenocine L, Pyrenocine M, Pyrenocine N,6-Hydroxymellein和Cyathisterol等9个化合物进行抗乳腺癌细胞(MDA)、肺癌细胞(A549)和胰腺癌细胞(PANC1)的活性检测,结果表明PyrenocineA的抗乳腺癌细胞活性最高,IC50小于2.0μg/mL;Pyrenocine B,Pyrenocine E和6-Hydroxymellein也有较高的抗肿瘤细胞活性,IC50小于30μg/mL。上述研究结果为筛选抗肿瘤先导化合物提供了有价值的参考。
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