杜仲叶总多酚的高效提取及应用研究

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杜仲(Eucommia ulmoides Oliver),为我国名贵滋补中药材。现代药理研究表明,杜仲叶与皮有着极其类似的化学成分及药理活性,叶中酚类化合物含量(如:绿原酸、黄酮等)更是高于皮。酚类化合物被称为“第七类营养素”,具有抗氧化、抗衰老、降血糖、抗菌消炎等多种药理活性,在食品、化妆品及医药行业具有广阔的市场前景。本文以杜仲叶为原料,在优化杜仲叶总多酚提取工艺的基础上,开展其相关活性及功效性研究,旨在为杜仲叶在食品和化妆品领域的开发和综合利用提供理论依据。1.采用超声波-微波双辅助法优化杜仲叶总多酚提取工艺。通过Plackett-Burman试验考察乙醇体积分数、料液比、微波功率、微波处理时间、超声波功率和超声波处理时间6个因素对杜仲叶总多酚提取效果的影响,筛选得到乙醇体积分数、料液比、微波功率和超声时间4个显著影响因素;通过最陡爬坡试验结合响应面试验得到最佳提取条件为:乙醇体积分数为46%,料液比为1:20.70(g:mL),微波功率为154 W,超声波处理时间为31 min。在此条件下总多酚得率达8.491%,与传统方法相比,总多酚得率明显提高。2.杜仲叶总多酚粗提物(Total polyphenols extract from Eucommia ulmoides leaves,EULTPE)抗氧化、抗羰基化活性研究。以Vc、二丁基羟基甲苯(Butylated hydroxytoluene,BHT)为阳性对照,考察EULTPE对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(·DPPH)、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基(ABTS·)、羟基自由基(OH)自由基的清除能力。结果表明,EULTPE具有良好的抗氧化活性,在一定浓度范围,其清除自由基效果与质量浓度成正相关。EULTPE清除·DPPH的能力强于BHT弱于Vc;清除ABTS·和·OH能力略弱于BHT和Vc。此外,研究还发现,EULTPE具有良好的抗羰基化效果,在试验浓度范围,其抗羰基化作用与质量浓度成正相关。在100 mg/L-500 mg/几浓度范围内,其抗羰基化效果显著。3.EULTPE抑菌活性研究。以硫酸庆大霉素为阳性对照,考察EULTPE对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用。结果表明:EULTPE具有广谱抗菌性,对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌有较好的抑制作用。EULTPE最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)为:沙门氏菌 0.700 mg/mL,金黄色葡萄球菌 0.350 mg/mL;最小杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC)为:沙门氏菌 1.400 mg/mL,金黄色葡萄球菌0.700 mg/mL。食品基质(蛋白质和碳水化合物)能影响EULTPE对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果;在含高浓度蛋白质(牛肉提取物)或碳水化合物(水溶性淀粉)培养基中,EULTPE的MIC值增大,抑菌效果减弱。在EULTPE的作用下,培养基中添加牛肉提取物可缩短沙门氏菌的迟缓期,且效果随着浓度的升高成负效应;在EULTPE的作用下,低蛋白浓度和低碳水化合物浓度可提高沙门氏菌的最大比生长速率。食品加工条件(温度和酸碱度)也能影响EULTPE对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果;高温和高pH可增大EULTPE的MIC值,减弱其抑菌效果。
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