四川部分地区鸡马立克病毒分子流行病学调查

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马立克病是鸡常见的一种淋巴细胞增生性疾病,主要引起各种组织和内脏器官的肿瘤,在养殖业中具有重要经济意义的一种病毒性疾病,病原由α疱疹病毒亚科马立克病毒属的马立克病毒所引起。疫苗的应用为该病的控制和预防起到重要作用,但随着马立克野毒毒力的不断增强,而不断获得突破现有疫苗免疫的能力。目前,马立克病对养禽业来说始终是一种威胁,因此分离分离鉴定分析目前流行的马立克野毒株毒力和特征对于监控野毒的变异和评价现有疫苗的免疫效果显得十分重要。从2008年到2010年,我们应用PCR方法从中国四川省部分地区的23个鸡场中563份血液中共检测到145份阳性样本,马立克病毒在鸡群中的平均感染率为25.7%,其中,在HVT免疫肉鸡群中MDV野毒感染率为20%-60%左右,在HVT免疫种鸡群中MDV野毒感染率为12.5%~42.5%左右,在CVI988免疫种鸡群中MDV野毒感染率几乎为零。从23个不同的鸡场中,我们共分离到了18株MDV野毒,PCR成功克隆并测序了18株野毒的致瘤性相关性基因Meq、pp38和vIL-8,应用DNAstar软件同GenBank上获得的其他参考序列进行核苷酸和氨基酸序列的同源性分析显示,核苷酸的同源性分别为97.7~99.6%、99.4-100%和99.0-99.5%,氨基酸的同源性分别为95.0-98.8%、99.3-100%和97.0-98.5%。此外,不同国家地区不同毒株的致瘤相关基因的比对分析发现,Meq中的4个氨基酸突变(第80、115、139、176位)和vIL-8中2个氨基酸的突变(第4、31位)在四川部分地区流行的MDV野毒中具有规律性的特征,可做为四川部分地区流行MDV野毒的分子特征之一。另外,基于Meq和vIL-8氨基酸序列构建的遗传进化树分析显示,四川分离的MDV野毒同中国其他地区分离的野毒在进化树中形成一个独立的分支。病毒的致病性和疫苗的免疫保护性试验显示四川部分地区分离的MDV野毒均属于强毒株,应用CVI988疫苗能给鸡群提供良好的免疫力。总之,本研究同GenBank上发表的其他参考序列比对分析揭示了中国四川部分地区流行毒株的致瘤相关基因Meq、pp38和vIL-8的主要分子特征,这三个基因中,某些位点碱基的突变,丢失和插入可作为四川部分地区流行MDV野毒的分子标记。本论文为MDV在四川部分地区流行的分子特征和该病的预防控制提供了宝贵的资料和数据。
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