miR-216b-5p在肾癌中的表达及其功能研究

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目的:肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)简称肾癌,是泌尿生殖系统中最常见的恶性肿瘤之一,也是肾脏实质中最常见的恶性肿瘤,其恶性程度较高。由于肾癌患者早期症状和体征往往不明显,缺乏特异性的临床表现,因此早期诊断较为困难,以致约三分之一的肾癌患者在明确诊断时肿瘤已经发生了远处脏器转移。由于肾癌对放疗和普通化疗不敏感,手术切除病灶成为有效的治疗方法,但是仍有20-30%的肾癌患者在接受手术治疗后出现了肿瘤复发。因此,研究肾癌发生发展的作用机制并寻找肾癌早期诊断、疗效评价、预后评估的分子标志物就显得尤为重要。微小RNA(micro RNA或者miRNA)是一类具有大约21-23个核苷酸长度的短链非编码RNA分子,它主要通过与靶基因的m RNA 3’端非编码区(3’-UTR区)一些特异性序列结合,从而降解靶基因m RNA或者抑制其翻译,在转录后水平起到调控基因表达的作用。目前的研究表明,miRNA在包括肾癌在内的多种肿瘤组织中异常表达,并参与细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡等生命过程之中。在此我们以miR-216b-5p和肾癌作为研究对象,研究miR-216b-5p在肾癌发生发展过程中的功能及相关致癌机制,为后续开展miRNA在肾癌诊断和治疗中的研究提供一些理论基础。方法:应用qRT-PCR方法检测41例肾癌组织和配对癌旁正常组织中miR-216b-5p的表达水平,并使用统计学软件分析miR-216b-5p在肾癌组织中的表达水平与患者临床病理特征之间的相关性。然后分别通过CCK-8增殖实验、细胞划痕实验和流式细胞术分别检测miR-216b-5p对肾癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。最后通过生物信息学方法预测miR-216b-5p的潜在靶基因。结果:与配对癌旁正常组织相比,miR-216b-5p在肾癌组织中的表达水平明显降低(P<0.05),而且其在肾癌组织中的表达水平与患者性别、年龄、病理类型、TNM分期、临床AJCC分期之间无明显相关性(P>0.05)。通过转染miR-216b-5pmimics上调肾癌细胞中miR-216b-5p的表达水平后,与对照组相比,细胞增殖和迁移能力受到抑制,同时促进了细胞凋亡(P<0.05)。结论:miR-216b-5p在肾癌组织中表达下调,并通过抑制肾癌细胞增殖和迁移,促进肾癌细胞凋亡,从而发挥抑癌基因作用。KRAS可能是miR-216b-5p的其中一个靶基因。
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