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本文研究了绿色木霉代谢抗生物质对芒果炭疽菌体外抑制作用,以及对损伤接种芒果炭疽菌芒果炭疽病的防效。利用液态发酵方式获取代谢产抗生物质,通过单因素试验,Plackett-burman试验和响应面CCD试验确定的最优发酵条件为:在基础培养液的基础上以葡萄糖为碳源,添加量为20g/L,补充氮源为玉米粉,添加量为10g/L,装瓶量为50mL/250mL锥形瓶(△),发酵温度为33.6℃,发酵种子绿色木霉菌菌龄为5d,表面活性剂吐温-80的添加量为1g/L,初始pH为10,发酵代谢抗生物质对芒果炭疽菌的抑制率为(81.47+4.03)%,与预测最大值80.56%非常接近。在对绿色木霉发酵液中抗生物质稳定性的研究中,发现它具有很好的热稳定性。当处理温度为100℃,处理30min后对芒果炭疽菌的抑制作用仍可高达71.51±0.54%。酸碱处理对抗生物质有一定的破坏作用,但当发酵液pH为2时的抑菌活性为73.23±0.89%,高出未处理对照组12%。Na+、K+、Mg2+、Fe2+作用下的抑菌活性差异不明显,而Fe3+处理过的绿色木霉发酵液能100%抑制芒果炭疽菌在PDA培养基上的生长。氧化剂对抗生物质具有明显的破坏作用;还原剂则与抗生物质之间存在一定的协调增效作用。除牛胰蛋白酶对其有一定的破坏作用外,其他酶作用不明显。绿色木霉代谢抗生物质的抑菌谱较广,当浓缩倍数为8时,对S. aureus、B. subtilis、B. cereus和P. vulgaris的抑菌圈直径分别为33.6±0.2mm、33.8±0.9mm、29.1±0.3mm和14.9±0.1mm。MIC测定结果为:S. aureus和B. cereus的MIC均为2倍浓缩发酵液;B. subtilis的MIC为4倍浓缩发酵液;在试验选取发酵液浓度下未得到P. vulgaris的MIC值。Fusarium oxysporum、C. gloeosporioides、Aspergillus niger和Paecilomyces Bainier的半抑制浓度(IC50)分别为1.37、1.39、4.24和4.07(以浓缩倍数计)。通过统计果实病斑数及面积,表明绿色木霉处理明显减低了损伤接种芒果的腐烂指数、病斑面积和接种发病率。通过对各处理组果实品质的测定,结果显示,绿色木霉发酵液处理组的果实硬度、色泽变化、可溶性固形物与对照组差异不明显。发酵液处理延缓了果实病斑周围的可滴定酸的下降及蛋白质含量的增加,提高了抗坏血酸(6-8d)含量,降低了丙二醛(6-9d)含量。果实防御酶活性检测结果显示,绿色木霉发酵液处理抑制损伤接种果实的PPO(7d)活性的升高,延缓了SOD酶活性下降,抑制了POD (5-7d)酶活性。另外,病斑周围果实清除DPPH的能力较对照明显增强(5-9d),果实中总酚含量也明显增加。CAT酶活和FRAP变化不明显。同工酶检测结果表明,POD同工酶谱带数较少,但是各处理间的变化差异较大;PPO同工酶谱带数较大,但变化较小。与同天对照组相比,处理组PPO同工酶谱带增加。SOD同工酶条带出现时间较对照晚,同期条带数也较之要多。