Thy0517细胞系的表面抗原表达、超微结构及遗传学特性

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胸腺瘤(thymoma)是常见的前纵隔原发性肿瘤,约占前纵隔肿瘤的50%,人群中总发病率为0.0015‰。由于胸腺瘤是一种罕见而独特的肿瘤,具有悠久的自然历史,增加了其研究难度。目前,仍缺乏一个具有前瞻性的临床诊断及治疗试验。就我们所搜集的文献报道来看,目前也仍未发现关于胸腺瘤患者生存率的相关分析。为了给胸腺瘤的诊断提供特异性生物学标志,开辟新的治疗途径,近年来,越来越多的研究人员将胸腺瘤研究侧重于揭示其发病、进展和转移机制等方面。在前期实验中,我们已对培养成熟的胸腺瘤细胞系Thy0517进行了细胞形态学观察、细胞生长曲线及倍增时间检测、裸鼠致瘤情况观察、免疫细胞化学相关抗原表达情况测定及常规制备染色体标本分析染色体众数等方面的研究。本期实验中,我们将对胸腺瘤细胞系Thy0517细胞的表面抗原表达、电镜下超微结构及遗传学特性(染色体畸变)进行进一步分析,为胸腺瘤的发生、发展及转移机制的研究提供更好的实验材料及依据。目的对已建立的人胸腺瘤细胞系Thy0517的细胞表面抗原表达情况、电镜下超微结构观察及遗传学特性(染色体畸变)进行鉴定。为研究胸腺瘤的发病、进展、转移机制以及探索新的临床治疗途径提供良好的实验材料。方法采用快融方法复苏已成功建立的胸腺瘤细胞系Thy0517;应用胰酶消化法进行传代培养;相差显微镜观察细胞形态学;应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测CD9、CD29、CD54、CD58在细胞表面抗原表达情况;应用Giesmsa显带技术观察细胞遗传学改变(染色体畸变)情况;应用透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)观察胸腺瘤细胞超微结构特点。结果与前期实验中第10代及40代细胞相比,经速融且稳定传代培养的胸腺瘤细胞系Thy0517其结构形态未见明显改变;流式细胞术结果显示,与阴性对照组比较,CD9、CD29、CD54、CD58在胸腺瘤Thy0517细胞表面均有阳性表达;染色体G显带分析,结果显示胸腺瘤细胞系Thy0517包含部分AB型胸腺瘤常见的染色体畸变,且表现出其特有的一些其他染色体畸变;在透射电子显微镜下观察到的细胞病变如下:细胞形态及细胞核完整,核形状不规则,核浆比例大,核内异染色质丰富,核仁大且边集,可见两个以上核仁等恶性肿瘤细胞特征。细胞间多为一般性连接,可见桥粒,体现了上皮细胞肿瘤的结构特征。结论人胸腺瘤细胞系Thy0517细胞形态及生长周期稳定,具有部分胸腺瘤细胞所共有的表面抗原以及常见AB型胸腺瘤存在的染色体畸变,超微结构提示细胞具有肿瘤特性。证实该胸腺瘤细胞系Thy0517是一个具有AB型胸腺瘤特征的稳定细胞系。可为胸腺瘤的发生、发展机制和新的临床治疗途径研究提供良好的实验材料。
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