基因工程和发酵工程技术的发展,使得重组蛋白质的异源表达成为生产蛋白质药物的重要途径。但是过量表达的蛋白质往往形成包涵体（不具有生物活性的非水溶性蛋白质聚集体）,因此包涵体的复性技术成为规模化生产蛋白质的技术难题之一。折叠助剂由于能够促进蛋白质的体外复性,近年来受到了研究者的极大关注。其中,温敏型聚合物N-异丙基丙烯酰胺（N-Isopropyl acrylamide,NIPAM）已被证实是一种有效的折叠助剂。但是已报道的线状、交联状和接枝到水凝胶表面的NIPAM存在分子量分布不易控制、溶胀速率慢、蛋白质损失严重、比表面积小和难于分离等诸多问题。因此,本论文提出以超大孔聚苯乙烯微球为基础,在其表面接枝含有NIPAM的聚合物刷,制备温敏型的超大孔微球。然后,利用该微球为折叠助剂,考察其尺寸效应、孔径效应和亲疏水效应对溶菌酶复性收率的影响,并对其复性工艺进行系统优化。首先,采用表面活性剂反胶团溶胀法制备超大孔聚苯乙烯微球,然后在微球表面接枝由NIPAM和甲基丙烯酸丁酯（Butyl Methacrylate,BMA）聚合而成的聚合物刷,最终获得温敏型超大孔PS-P（NIPAM-co-BMA）微球。在此基础上,通过调控表面活性剂的添加量、搅拌速率和接枝量,制备出不同粒径（91μm、76μm和61μm）、不同孔径（320nm、94 nm和62 nm）、不同接枝量（35.6 mg/m~2、15.9 mg/m~2和1.3 mg/m~2）的七种微球。其次,选用溶菌酶作为模型蛋白质,以其活性收率为标准,考察七种微球对溶菌酶复性的影响,确定最佳微球为:粒径74μm、孔径320 nm、接枝量35.6 mg/m~2的微球;该微球的最佳添加量为5 g/L,且微球使用5次后溶菌酶复性的活性收率仍高达63.6%。最后,本文又对微球辅助溶菌酶复性过程的工艺参数进行了单因素优化,获得的最佳工艺条件为:溶菌酶初始浓度1.0 g/L,尿素浓度2.0 M,复性温度30 oC,复性溶液pH值为8.5,摇床转速150 rpm,复性时间14 h。在此基础上,利用Plackett-Burman设计和响应面法对三个显著因子（复性温度、尿素浓度和溶菌酶初始浓度）的交互作用进行了分析,获得的最佳条件为:复性温度30oC、尿素浓度1.96 M和溶菌酶初始浓度1.02 g/L。在此条件下,溶菌酶复性的活性收率为72.30%,与理论预测值73.59%非常接近,说明该模型可以用于溶菌酶复性条件的优化。