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目的：
探讨香芹酚(Carvacrol，CV)对卵巢癌细胞有氧糖酵解的影响，以及香芹酚通过HIF-1a影响卵巢癌有氧糖酵解的分子机制，为卵巢癌治疗提供新的策略和思路。
方法：
1.本研究使用不同浓度的香芹酚处理卵巢癌SKOV3和HO8910细胞48h后，采用MTT法、比色法检测香芹酚对卵巢癌增殖的影响及半数抑制率(IC50)和细胞培养基中葡萄糖及乳酸含量。通过qRT-PCR、Westernblot从mRNA及蛋白水平检测有氧糖酵解相关分子HIF-1a、HK2、LDHA的表达情况。
2.筛选HIF-1a低表达卵巢癌细胞系，建立稳定过表达HIF-1a的卵巢癌细胞株，通过MTT法、葡萄糖及乳酸比色检测法、Westernblot方法检测HIF-1a过表达后，给予香芹酚处理对卵巢癌细胞增殖、葡萄糖摄取、乳酸生成及有氧糖酵解相关分子的影响。
结果：
本研究使用0mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L不同浓度的香芹酚处理SKOV3及HO8910两株卵巢癌细胞株，48h后使用MTT法测得细胞生长抑制率。结果显示：香芹酚对SKOV3及HO8910细胞生长具有抑制作用，两细胞增殖率分别为：100、65.32±3.13、55.34±2.02、45.03±2.42、33.17±4.23%及100、68.41±4.29、53.61±3.55、45.12±2.64、35.38±2.78%，随着香芹酚浓度增加，细胞增殖逐渐被抑制，并取得半数抑制剂量(IC50)为120mg/L进行后期研究。
使用同样的方法处理这两株卵巢癌细胞株，使用比色法检测葡萄糖摄取量及乳酸生成量。结果显示：在SKOV3及HO8910细胞中，香芹酚处理48h后两细胞葡萄糖摄取量分别为：14.09±0.32、12.32±0.21、11.11±0.24、10.20±0.34、8.93±0.17mM/106cells及8.32±1.23、7.83±1.11、6.61±1.31、5.94±1.22、4.98±1.01mM/106cells，香芹酚处理48h后两细胞外乳酸含量分别为：17.54±1.11、14.96±1.32、13.32±1.28、12.19±1.19、9.68±1.21mM/106cells及14.94±0.93、13.21±1.14、12.12±1.19、10.10±1.34、8.29±1.32mM/106cells，随着香芹酚浓度增加，摄取葡萄糖及细胞外乳酸含量逐渐被抑制(P＜0.05)。
SKOV3及HO8910卵巢癌细胞予以香芹酚处理48h后，利用qRT-PCR及Westernblot技术检测卵巢癌细胞中有氧糖酵解相关分子HIF-1a、HK2和LDHA的mRNA及蛋白水平变化，结果显示：香芹酚明显抑制卵巢癌细胞中HIF-1a、HK2及LDHA表达水平(P＜0.05)。
我们使用qRT-PCR及Westernblot筛选HIF-1a低表达卵巢癌细胞系HO8910，构建了稳定过表达HIF-1a细胞系(HO8910/HIF-1a)及空白对照细胞系HO8910/control)。HIF-1a稳定表达改变细胞经香芹酚处理后，MTT法检测发现：香芹酚可以抑制卵巢癌细胞增殖，过表达HIF-1a可以明显促进细胞增殖并且HIF-1a过表达对香芹酚抑制卵巢癌细胞增殖能力具有拮抗作用(P＜0.05)。比色法检验葡萄糖摄取及乳酸生成量。结果发现：香芹酚可以抑制卵巢癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成，过表达HIF-1a可以明显促进细胞葡萄糖摄取及乳酸生成并且HIF-1a过表达对香芹酚抑制卵巢癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成能力具有拮抗作用(P＜0.05)。
HIF-1a稳定表达改变细胞经香芹酚处理后，使用Westernblot方法检测发现：过表达HIF-1a可以上调HK2、LDHA表达，香芹酚可以抑制HK2与LDHA表达，并且HIF-1a过表达可以明显削弱香芹酚对HK2、LDHA的抑制作用(P＜0.05)。
结论：
1.香芹酚可以抑制卵巢癌细胞有氧糖酵解。
2.香芹酚可以通过下调HIF-1a表达抑制卵巢癌细胞有氧糖酵解。
探讨香芹酚(Carvacrol，CV)对卵巢癌细胞有氧糖酵解的影响，以及香芹酚通过HIF-1a影响卵巢癌有氧糖酵解的分子机制，为卵巢癌治疗提供新的策略和思路。
方法：
1.本研究使用不同浓度的香芹酚处理卵巢癌SKOV3和HO8910细胞48h后，采用MTT法、比色法检测香芹酚对卵巢癌增殖的影响及半数抑制率(IC50)和细胞培养基中葡萄糖及乳酸含量。通过qRT-PCR、Westernblot从mRNA及蛋白水平检测有氧糖酵解相关分子HIF-1a、HK2、LDHA的表达情况。
2.筛选HIF-1a低表达卵巢癌细胞系，建立稳定过表达HIF-1a的卵巢癌细胞株，通过MTT法、葡萄糖及乳酸比色检测法、Westernblot方法检测HIF-1a过表达后，给予香芹酚处理对卵巢癌细胞增殖、葡萄糖摄取、乳酸生成及有氧糖酵解相关分子的影响。
结果：
本研究使用0mg/L、50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L不同浓度的香芹酚处理SKOV3及HO8910两株卵巢癌细胞株，48h后使用MTT法测得细胞生长抑制率。结果显示：香芹酚对SKOV3及HO8910细胞生长具有抑制作用，两细胞增殖率分别为：100、65.32±3.13、55.34±2.02、45.03±2.42、33.17±4.23%及100、68.41±4.29、53.61±3.55、45.12±2.64、35.38±2.78%，随着香芹酚浓度增加，细胞增殖逐渐被抑制，并取得半数抑制剂量(IC50)为120mg/L进行后期研究。
使用同样的方法处理这两株卵巢癌细胞株，使用比色法检测葡萄糖摄取量及乳酸生成量。结果显示：在SKOV3及HO8910细胞中，香芹酚处理48h后两细胞葡萄糖摄取量分别为：14.09±0.32、12.32±0.21、11.11±0.24、10.20±0.34、8.93±0.17mM/106cells及8.32±1.23、7.83±1.11、6.61±1.31、5.94±1.22、4.98±1.01mM/106cells，香芹酚处理48h后两细胞外乳酸含量分别为：17.54±1.11、14.96±1.32、13.32±1.28、12.19±1.19、9.68±1.21mM/106cells及14.94±0.93、13.21±1.14、12.12±1.19、10.10±1.34、8.29±1.32mM/106cells，随着香芹酚浓度增加，摄取葡萄糖及细胞外乳酸含量逐渐被抑制(P＜0.05)。
SKOV3及HO8910卵巢癌细胞予以香芹酚处理48h后，利用qRT-PCR及Westernblot技术检测卵巢癌细胞中有氧糖酵解相关分子HIF-1a、HK2和LDHA的mRNA及蛋白水平变化，结果显示：香芹酚明显抑制卵巢癌细胞中HIF-1a、HK2及LDHA表达水平(P＜0.05)。
我们使用qRT-PCR及Westernblot筛选HIF-1a低表达卵巢癌细胞系HO8910，构建了稳定过表达HIF-1a细胞系(HO8910/HIF-1a)及空白对照细胞系HO8910/control)。HIF-1a稳定表达改变细胞经香芹酚处理后，MTT法检测发现：香芹酚可以抑制卵巢癌细胞增殖，过表达HIF-1a可以明显促进细胞增殖并且HIF-1a过表达对香芹酚抑制卵巢癌细胞增殖能力具有拮抗作用(P＜0.05)。比色法检验葡萄糖摄取及乳酸生成量。结果发现：香芹酚可以抑制卵巢癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成，过表达HIF-1a可以明显促进细胞葡萄糖摄取及乳酸生成并且HIF-1a过表达对香芹酚抑制卵巢癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成能力具有拮抗作用(P＜0.05)。
HIF-1a稳定表达改变细胞经香芹酚处理后，使用Westernblot方法检测发现：过表达HIF-1a可以上调HK2、LDHA表达，香芹酚可以抑制HK2与LDHA表达，并且HIF-1a过表达可以明显削弱香芹酚对HK2、LDHA的抑制作用(P＜0.05)。
结论：
1.香芹酚可以抑制卵巢癌细胞有氧糖酵解。
2.香芹酚可以通过下调HIF-1a表达抑制卵巢癌细胞有氧糖酵解。