锦灯笼的质量标准研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:popopan22
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目的:1.通过对锦灯笼药材采收期、药用部位及干燥工艺的研究,确定锦灯笼的采收期、药用部位及干燥工艺。2.采用高效液相色谱法,对锦灯笼宿萼、果柄中酸浆苦素L、绿原酸、木犀草苷及木犀草素,果实中咖啡酸、阿魏酸及木犀草苷进行含量测定,并采用综合评分的方法评价优劣;同时建立锦灯笼宿萼及果实指纹图谱,从两个方面系统地建立锦灯笼的质量评价体系,为锦灯笼的质量控制提供依据。3.通过对锦灯笼果实粉末特征物的观察,选取锦灯笼果实中的石细胞为显微特征细胞,通过对锦灯笼果实中石细胞的显微特征指数的测定,从而建立锦灯笼的显微定量研究方法。4.通过采用SPSS统计软件,研究锦灯笼果实中有效成分的含量与石细胞的显微特征指数之间的相关关系,为评价锦灯笼药材的质量提供依据。材料与方法:1.采用高效液相色谱法对不同采收期的锦灯笼宿萼、果柄及果实分别进行含量测定,从而确定锦灯笼的采收期。2.对锦灯笼全果、宿萼、果柄及果实分别进行提取并测定含量,比较全果与宿萼、果柄及果实的含量差异,从而确定锦灯笼的药用部位。3.对锦灯笼宿萼、果柄、果实分别进行热风烘干、自然晒干及(晒后)阴干处理,并对干燥后的不同部位进行含量测定,从而确定其干燥方法。4.采用高效液相色谱法,以等度洗脱的方式测定锦灯笼宿萼及果柄中酸浆苦素L的含量。色谱柱:Agi Lent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水,流速1m L/min;柱温:30℃;检测波长:230nm;进样量10μL。5.采用高效液相色谱法,以梯度洗脱、切换波长的方式测定锦灯笼宿萼、果柄中绿原酸、木犀草苷、木犀草素的含量。色谱柱:Agi Lent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈,流动相B为0.2%的磷酸水;流速1m L/min;柱温:30℃;检测波长:328nm(0~15min)、348nm(15~50min);进样量10μL。6.采用高效液相色谱法,以梯度洗脱、切换波长的方式测定锦灯笼果实中咖啡酸、阿魏酸及木犀草苷的含量。色谱柱:Agi Lent TC-C18(150mm×4.6mm,4μm);流动相:乙腈-0.5%磷酸水,流速1m L/min;柱温:30℃;检测波长:323nm(0min~30min)、348nm(30min~50min);进样量10μL。7.采用高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式建立锦灯笼宿萼的指纹图谱。色谱柱:Agi Lent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.5%磷酸水,流速1m L/min;柱温:30℃;检测波长:220nm;进样量10μL。8.采用高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式建立锦灯笼果实的指纹图谱。色谱柱:Agi Lent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-1%磷酸水,流速1m L/min;柱温:30℃;检测波长:323nm;进样量10μL。9.采用显微定量的方法测定锦灯笼果实中石细胞的显微特征指数,并通过SPSS统计软件建立果实中三种成分的含量和石细胞的显微特征指数之间的数学模型,以确定其相关关系。结果:1.通过对不同采收期的锦灯笼宿萼、果柄中绿原酸、木犀草苷及木犀草素,果实中咖啡酸、阿魏酸及木犀草素的含量测定,从综合评分的结果证明锦灯笼宿萼、果柄及果实均在九月初综合评分最高。2.通过对锦灯笼全果、宿萼和果柄中绿原酸、木犀草苷及木犀草素的含量测定,以及果实中咖啡酸、阿魏酸及木犀草苷的含量测定,结果表明折算后全果中以上几种成分含量与宿萼、果柄及果实中的含量差异较小。3.通过对锦灯笼宿萼、果柄及果实在不同干燥方法的考察,结果表明锦灯笼宿萼中的绿原酸、木犀草苷、木犀草素均在烘干条件下绿原酸含量最高,其次为自然晒干,最后为阴干;而果柄中的绿原酸在阴干条件下含量最高,其次为晒干、烘干,而木犀草苷和木犀草素则在烘干条件下含量最高,其次为晒干、阴干。锦灯笼果实中的咖啡酸、阿魏酸、木犀草苷均以烘干条件下含量最高,咖啡酸、阿魏酸含量晒后阴干次之,含量最低的为晒干。4.通过对不同产地锦灯笼宿萼中酸浆苦素L的含量测定,结果表明宿萼中酸浆苦素L的含量差异较大,其含量范围在0.5276mg/g~1.534mg/g之间。5.通过对不同产地锦灯笼宿萼及果柄中绿原酸、木犀草苷及木犀草素的含量测定,结果表明宿萼中三种成分的含量差异均较大,绿原酸的含量范围在0.9630mg/g~3.552mg/g之间;木犀草苷的含量范围在0.6623mg/g~3.052mg/g之间;木犀草素的含量范围在0.01080mg/g~0.1091mg/g之间;酸浆苦素L的含量范围在0.5276mg/g~1.534mg/g之间。锦灯笼果柄中的三种成分差异也较大,绿原酸的含量范围在0.1998mg/g~2.314mg/g之间;木犀草苷的含量范围在0.1556mg/g~2.033mg/g之间;木犀草素的含量范围在0.01182mg/g~0.07728mg/g之间。6.通过对不同产地锦灯笼果实中咖啡酸、阿魏酸和木犀草苷的含量测定,结果表明果实中三种成分含量差异均较大,咖啡酸的含量范围在0.01388mg/g-0.04510mg/g之间;阿魏酸的含量范围在0.01827mg/g-0.07029mg/g之间;木犀草苷的含量范围在:0.006649mg/g-0.01460mg/g之间。7.通过建立锦灯笼宿萼的HPLC指纹图谱,以木犀草苷为参照峰,共确立了18个共有峰。8.通过建立锦灯笼果实的HPLC指纹图谱,以阿魏酸为参照峰,共确立了21个共有峰。9.锦灯笼果实中石细胞的显微特征指数差异较大:其范围在62.6个/mg~212.3为个/mg之间。10.分别以锦灯笼果实中咖啡酸、阿魏酸、木犀草苷的含量为自变量,石细胞的显微特征指数为因变量,结果得到阿魏酸与石细胞的显微特征指数呈负相关,咖啡酸、木犀草苷的含量与石细胞的显微特征指数无相关性。结论:1.辽宁地区锦灯笼药材的采收期应为九月上旬。2.建议锦灯笼的用药部位为带果柄的宿萼或全果。3.锦灯笼的干燥方法应为烘干。4.确定了果实的含量测定方法,不同产地锦灯笼药材的质量存在差异,可作为质量标准含量测定项下的测定指标。5.通过综合评分结果可知,沈阳的锦灯笼药材质量较优,其次为丹东,盘锦锦灯笼药材的质量较差。6.建立的锦灯笼宿萼及果实的HPLC指纹图谱,可为锦灯笼在定性鉴别方面提供科学依据。7.锦灯笼果实石细胞显微特征指数存在一定的差异,由此可作为区别不同产地锦灯笼药材质量的依据。8锦灯笼果实中石细胞的显微特征指数与阿魏酸含量呈显著的负相关,咖啡酸与木犀草苷与石细胞的显微特征指数无相关性。该方法稳定可行,在显微定量方面为锦灯笼的质量制定提供了新方法、新手段,并为锦灯笼质量标准的制定提供了依据。
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