华蟾素联合三氧化二砷对人胃癌SGC-7901细胞作用的研究

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【目的】1.观察华蟾素、三氧化二砷及两药联合对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。2.探讨华蟾素与三氧化二砷联合对人胃癌SGC-7901细胞是否具有协同作用。3.探索胃癌治疗的新方法,为临床用药提供实验依据。【方法】1.将体外培养、处于对数生长期的人胃癌SGC-7901细胞分为阴性对照组、华蟾素(cino)组、As2O3组和华蟾素+As2O3组,分别用不同浓度梯度的As2O3(1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)和华蟾素(0.125μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml)单独或联合作用于胃癌细胞SGC-7901。2.采用MTT(四甲基偶氮唑蓝)还原法分别检测华蟾素、As2O3单独应用及二者联合应用对胃癌SGC-7901细胞生长的影响。3.用倒置相差显微镜分别对阴性对照组、单药组、联合用药组在24h、48h、72h做细胞凋亡的形态学观察。4.用流式细胞术(FCM)分别检测华蟾素、As2O3单独应用及二者联合应用对胃癌SGC-7901细胞的细胞周期及细胞凋亡率的影响。【结果】1.于倒置显微镜下观察细胞形态可见,在低浓度华蟾素或As2O3作用下,即可见人胃癌SGC-7901细胞呈凋亡形态学改变,细胞缩小变圆,贴壁较差,较高药物浓度时细胞形态表现为坏死改变,可见细胞内空泡,并有大量坏死碎片。2.采用MTT进行分析的结果显示,华蟾素、As2O3单独作用于人胃癌SGC-7901细胞均具有增殖抑制作用,且随着药物浓度的增大或作用时间的延长,抑制作用逐渐增强,即其增殖抑制作用与药物的浓度和作用时间存在正相关性。两药联合对细胞的增殖抑制作用与单药组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.细胞周期分析显示,与对照组相比,华蟾素作用于人胃癌SGC-7901细胞时,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,细胞被阻滞于G0/G1期,As2O3作用胃癌SGC-7901细胞时,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高,细胞被阻滞于S期。两药联合作用于人胃癌SGC-7901细胞48h后,G0/G1期和S期细胞比例均升高,细胞被阻滞于G0/G1和S期(P<0.05)。4.华蟾素、As2O3对人胃癌SGC-7901细胞均具有凋亡诱导作用,华蟾素与As2O3联合作用于人胃癌SGC-7901细胞48h后,细胞凋亡率与华蟾素组和As2O3组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】华蟾素与三氧化二砷均具有抑制人胃癌SGC-7901细胞生长的作用,其对胃癌SGC-7901细胞均具有增殖抑制和凋亡诱导的作用,二者联合应用对胃癌细胞可发挥协同性作用,主要表现在抑制胃癌细胞的增殖及促进胃癌细胞的凋亡,这种杀伤作用与药物的浓度和作用时间存在相关性。
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