【摘 要】
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过氧化物酶(Peroxidase, POD, EC1.11.1.7),是一类以血红素为辅基的氧化酶,在生物界中广泛存在,作为一种抗氧化剂,参与了次生物质的代谢、生长激素的氧化等多种生理化学反应,
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过氧化物酶(Peroxidase, POD, EC1.11.1.7),是一类以血红素为辅基的氧化酶,在生物界中广泛存在,作为一种抗氧化剂,参与了次生物质的代谢、生长激素的氧化等多种生理化学反应,该酶已广泛应用于环保、食品工业、医学诊断、生物传感器等领域。以新鲜韭菜为原料,经匀浆、抽提、硫酸铵分级沉淀、CM-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析,获得了电泳纯的韭菜POD。该酶比活力达到14031.41U/mg,纯化倍数为102.96,回收率为10.85%。经过SDS-PAGE及Superdex-200凝胶过滤层析,测得该POD的相对分子质量约为28.4kD;最适温度为40℃,最适pH为4.6,在20-40。C以及pH 4-8有较好的稳定性;在最适条件下测得其Km值为18.15mmol/L。在几种化学试剂试验中,低浓度草酸、Zn2+、Mg2等对该酶有较强激活作用;甲醇、乙醇、异丙醇、十二烷基磺酸钠(SDS)、抗坏血酸(AsA)以及Mn2+Fe3+等对该酶有较强的抑制作用。采用不同化学修饰剂对该酶的功能基团进行修饰,结果表明:二硫键及巯基是其活性中心的必需基团,而酪氨酸酚羟基、组氨酸残基、丝氨酸残基不是该酶活性中心的必需基团。
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