副溶血弧菌作为一种典型的食源性致病菌,广泛存在于沿海地区的海产品中,因食用被副溶血弧菌侵染的食物而导致的食物中毒事件在我国各省每年均有发生,因此建立起针对副溶血弧菌的高效、快速且特异性的检测是目前研究的重中之重。基于目前的紧迫情况,我们开发了针对检测副溶血弧菌食物侵染的特异性方法,本方法采取了创新性的手段和材料,与经典的和最新的方法比较具有较高的特异性以及较短的时长,十分适用于现场的快速检测。主要研究内容与结果如下:1.我们开发了一种先进的cell-SELEX策略,该策略以功能化石墨烯和等温滚环扩增为特色,以筛选针对食源性病原体-副溶血性弧菌的适配体。将聚乙二醇（PEG）和壳聚糖（CTS）接枝到片状氧化石墨烯分子上,合成了 PC-GO材料。功能化的氧化石墨烯能够提高缓冲液的溶解度,从而吸附非特异性的ssDNA来提高筛选的准确性。而两轮等温扩增方法为我们针对SELEX而新建立的一种分子扩增方法,它能够大大地缩短筛选的时长,提高筛选的效率。TEM和FT-IR表征表明,PC-GO复合材料具有近纳米尺度,可以与与靶细胞亲和力较低的ssDNA结合,从而大大提高筛选效率。利用互补环介导法将候选的适配体扩增了107倍,该扩增方法可产生单链产物,可直接用于下一轮筛选。2.将建立的扩增方法与加入了功能化氧化石墨烯的全新的cell-SELEX方法结合,我们能够确定一整套合理且流畅的适配体筛选过程。由此过程我们得到了四条与副溶血弧菌高度结合的适配体单链,并将这四条适配体与副溶血弧菌的特异性与亲和力均进行测试分析。特异性结果表明,这四条适配体均与副溶血弧菌存在较高的匹配性,但对其他相似的食源性致病菌结合能力很弱,说明筛选结果较为良好。Kd值分析结果表明,经筛选得到的四条适配体与靶标存在较高亲和性,并能各自形成相应的二级结构,其中Apt-2的亲和性最高。3.我们建立了一种应用于副溶血性弧菌快速、可视化检测的生物传感器。利用与副溶血性弧菌表面特异性结合的锚定适配体,在链霉亲和素磁珠的作用下,从食物基质中分离和富集细菌。检测适配体（D-Apt）结合于细胞表面的不同位点,作为信号报告子。在此制备了具有增强扩增速率的CA-RCA来放大D-Apt,从而产生催化ABTS2-氧化的单体G4序列,从而产生肉眼可见的着色。该方法不需要提取DNA,输出可视化信号,不需要昂贵的仪器,使得Dual-Apt和CA-RCA成为现场快速检测的理想策略。在优化了实验条件和试剂浓度后,本方法在建立时能够达到较为标准的结果,且针对副溶血弧菌的特异性上表现良好,能够对靶标有较准确且灵敏的检测结果,并且可以运用于实际的食物样本的检测中去,检测结果与经典的平板培养计数法和PCR方法一致。