论文部分内容阅读
背景抑郁症(Major depressive disorder,MDD)是一种常见的精神疾病,炎症被认为与抑郁症发病密切相关。NLRP1炎症小体介导的炎症反应参与了多种神经系统疾病的发生。然而,NLRP1炎症小体在抑郁症发生中的作用尚不清楚。目的观察NLRP1炎症小体在慢性应激诱导小鼠抑郁样行为中的作用及可能的分子机制。方法通过慢性不可预见性轻度应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS),慢性社会挫败应激(Chronic social defeat stress,CSDS),重复社会挫败应激(Repeat social defeat stress,RSDS)和慢性束缚应激(Chronic restrain stress,CRS)建立小鼠抑郁模型,利用旷场实验(Open field test,OFT),悬尾实验(Tail suspension test,TST),强迫游泳实验(Forced swimming test,FST),社会接触实验(Social interaction test,SIT),明暗交替实验(Light-dark test,LDT)和糖水偏爱实验(Sucrose preference test,SPT)评价小鼠抑郁样行为。采用Western blot检测炎症小体复合物NLRP1,ASC,Caspase-1和BDNF的蛋白表达。PCR检测炎症小体复合物NLRP1,ASC,Caspase-1和趋化因子CXCL1,CXCR2的m RNA表达。ELISA法检测炎症因子IL-6,IL-18,IL-1β和TNF-α水平。通过海马区注射以腺相关病毒(AAV)为载体构建的Nlrp1a-sh RNA-e GFP沉默Nlrp1a。结果1.与对照组相比,慢性应激刺激导致小鼠糖水偏爱率显著降低,悬尾实验和强迫游泳实验的不动时间明显延长。旷场总移动距离,穿线次数和中心区域停留时间明显减少,明亮区域所处时间及社会接触率也明显降低,提示抑郁模型建立成功;同时,抑郁样小鼠海马炎症小体复合物NLRP1,ASC和Caspase1的表达均显著升高,其相关炎性因子IL-18,IL-1β,TNF-α和IL-6的水平也明显升高。海马区Nlrp1a基因沉默明显抑制NLRP1炎症小体激活及相关炎症反应。与模型组相比,海马区Nlrp1a基因沉默使小鼠的糖水偏爱率,总移动距离,穿线次数和中心区域停留时间明显增加,悬尾实验和强迫游泳实验的不动时间显著减小,明亮区域所处时间及社会接触率也明显增加,改善了其抑郁样行为。而海马区注射control sh RNA对应激诱导的抑郁样行为和相关蛋白的表达无影响。2.与对照组相比,慢性应激刺激导致小鼠海马CXCL1和CXCR2的表达明显增加,而脑源性神经营养因子BDNF的表达则明显降低。海马区Nlrp1a基因沉默抑制慢性应激诱导的CXCL1和CXCR2表达的上调,逆转了脑源性神经营养因子BDNF表达的下调。结论NLRP1炎症小体介导慢性应激诱导的小鼠抑郁样行为,其机制可能与CXCL1/CXCR2/BDNF信号途径相关。因此,NLRP1炎症小体可能是潜在的抗抑郁药的靶标,抑制NLRP1炎症小体可以减轻慢性应激诱导的抑郁样行为。