清络通痹方为国医大师周仲瑛教授临床治疗类风湿关节炎的有效验方,由雷公藤、三七、生地、青风藤、僵蚕、桑寄生、豨签草、络石藤组成。方中雷公藤Triptergium wilfordii Hook f.为治疗风湿顽痹之要药,但因其有大毒,限制了清络通痹方的拓展应用。实验室前期对复方中雷公藤配伍减毒的化学物质基础及药代动力学研究发现,三七、生地为方中与配伍减毒有关的主要药味,且减毒作用与雷公藤中毒性成分雷公藤甲素的体内过程有关。本论文以清络通痹精简方(雷公藤、三七、生地三味药组成)为研究体系,通过配伍减毒的化学基础、体内药物吸收过程研究来阐明其减毒机理。开展的研究工作如下:1.清络通痹精简方雷公藤配伍减毒的化学基础研究:选取全方组、单味雷公藤组、雷公藤配伍三七组、雷公藤配伍生地组为研究对象,比较各组水煎煮后三种指标性成分——雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲的溶出量。结果显示:单味雷公藤组中雷公藤甲素的含量最高,雷公藤内酯甲次之,雷公藤红素的含量最低;在雷公藤药材用量相同的情况下,上述各配伍组中三种指标性成分的溶出趋势一致,即单味雷公藤组>雷公藤配伍三七组>雷公藤配伍生地组>全方组。该结果从化学成分溶出的角度证明了复方配伍减毒的合理性。2.清络通痹精简方配伍减毒的体内吸收过程研究:(1)选取全方组、单味雷公藤组、雷公藤配伍三七组、雷公藤配伍生地组为研究对象,水煎煮后灌胃给予SD大鼠。分别检测给药1～7天后各组的肝肾功能指标及肝肾病理组织切片,同时检测各组给药后的大鼠血浆中三种指标性成分——雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲的浓度,计算药物动力学参数。结果显示:与空白组相比,单味药雷公藤组大鼠灌胃给药3、7天后各组肝肾毒性结果明显,而其他配伍组无肝肾毒性。大鼠血浆中血药浓度检测发现,全方及雷公藤配伍组中指标性成分雷公藤甲素和雷公藤内酯甲的AUC(0-∞)和Cmax均明显降低(雷公藤红素未检出),说明配伍使用降低了雷公藤甲素和雷公藤内酯的入血浓度;且通过计算药动学参数发现,Cmax降低的同时V/F增加、Tmax延长,说明配伍使用降低了雷公藤甲素和雷公藤内酯甲在大鼠体内的吸收。(2)采用在体肠灌流模型比较单味雷公藤组、雷公藤配伍三七、雷公藤配伍生地和全方组中三种指标性成分——雷公藤甲素、雷公藤红素和雷公藤内酯甲的肠吸收特征。结果显示,上述三种成分在配伍组和全方组的肠壁吸收有效渗透系数、10cm%肠吸收百分率和肠吸收速率常数都明显降低,且全方组均为最低。上述研究结果进一步证明了复方配伍减毒的合理性,从体内吸收过程阐明了雷公藤的配伍减毒机理。