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目的：构建结核分枝杆菌CFP10-PPE68融合基因原核表达质粒，在大肠杆菌BL21中观察CFP10-PPE68融合基因的表达，并用亲和层析法分离纯化重组蛋白；用纯化的CFP10-PPE68重组蛋白作为诊断抗原，间接ELISA法检测临床诊断为肺结核病人和肺外结核病人血清标本中相应抗体，并判断其特异性、敏感性和准确性。为结核病的早期诊断提供新的思路。方法：1.以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，用PCR方法分别扩增CFP10和PPE68基因，然后用基因拼接法扩增CFP10-PPE68融合基因，将其克隆至pET32a(+)载体中，构建重组的原核表达质粒pET32a(+)/CFP10-PPE68，转化至E.coli BL21中，经IPTG诱导表达后，对表达产物进行鉴定。2.将纯化的CFP10-PPE68重组蛋白作为诊断抗原，间接ELISA法检测临床诊断为肺结核病人（251例）、肺外结核病人（66例）和健康体检者（52例）共369例血清标本中相应抗体，并判断其特异性、敏感性和准确性。结果：1．重组的原核表达质粒pET32a(+)/CFP10-PPE68双向测序结果显示与CFP10-PPE68基因编码序列完全一致，表达产物可见相对分子质量约68000的蛋白条带，为CFP10（相对分子质量10900）、PPE68(相对分子质量37330)与Trx-His(相对分子质量20400)的融合蛋白条带。2.CFP10-PPE68重组蛋白作为诊断抗原，以临床诊断为金标准，52例健康体检者为阴性对照，检测肺结核病人和肺外结核病人结核分枝杆菌感染的敏感性分别为98.4%，98.3%，特异性分别为27.6%，85.0%，准确性分别为56.1%，91.5%。结论：1.成功的将结核分枝杆菌特异性基因CFP10、PPE68融合克隆入原核表达质粒pET32a(+)中，并在E.coli BL21中成功表达。2.CFP10-PPE68蛋白作为诊断抗原，诊断结核分枝杆菌感染，特别是对难以诊断的肺外结核病诊断有一定参考价值。