【摘 要】
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背景肝癌早期临床症状比较隐匿因此导致大多数患者在确诊后已经丧失了最佳治疗时机,目前临床上通常采取介入、放化疗的方法来治疗肝癌晚期的患者,但是因为患者的不良反应大以及疗效较差,患者5年生存率相对较低[1-2]。研究结果发现,微小RNA(micro RNA,miRNA)可通过直接调控靶基因的表达从而有效地参与肝癌的发生、发展过程[3-4]。本研究主要探讨了miR-369-3p通过影响Cyclin D1
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背景肝癌早期临床症状比较隐匿因此导致大多数患者在确诊后已经丧失了最佳治疗时机,目前临床上通常采取介入、放化疗的方法来治疗肝癌晚期的患者,但是因为患者的不良反应大以及疗效较差,患者5年生存率相对较低[1-2]。研究结果发现,微小RNA(micro RNA,miRNA)可通过直接调控靶基因的表达从而有效地参与肝癌的发生、发展过程[3-4]。本研究主要探讨了miR-369-3p通过影响Cyclin D1蛋白(细胞周期活性蛋白1)、P21蛋白、Bcl-2蛋白(b淋巴细胞瘤-2凋亡蛋白)、Bax蛋白(b淋巴细胞瘤-2相关蛋白)的表达对人肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用,为临床诊断和治疗提供新思路。目的探讨miR-369-3p在人肝癌组织中的表达情况及其通过影响Cyclin D1蛋白、P21蛋白、Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达对人肝癌细胞增殖及凋亡的调控作用。方法本研究采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(q RT-PCR,real-time quantitative polymerase chain reaction)分别对人体肝癌组织和肝癌旁组织中的miR-369-3p的表达情况进行检测。体外培养MHCC97H肝癌细胞,采用活性脂质酸受体法将miR-369-3p模拟物(miR-369-3p mimics)和miRNA阴性对照物(miR-NC)分别转染至MHCC97H肝癌细胞,采用甲基噻唑基四唑(MTT,methylthiazolyltetrazolium)法检测肝癌细胞的增殖情况;采用流式细胞术检测肝癌细胞的凋亡情况;采用蛋白质印迹法(Western blot)法检测Cyclin D1蛋白、P21蛋白、Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达情况。结果1.肝癌的组织中miR-369-3p的表达明显低于肝癌旁的组织(P<0.05);2.体外细胞实验中,miR-369-3p组相比较于miR-NC组,Cyclin D1蛋白表达水平明显降低,P21蛋白表达水平明显升高,细胞活力明显下降(P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax蛋白表达水平明显升高,细胞凋亡率明显升高(P<0.05),提示miR-369-3p过表达可以抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡。结论1.miR-369-3p在肝癌组织中呈低表达,在癌旁组织中高表达。2.miR-369-3p可以通过负调控Cyclin D1蛋白、正调控P21蛋白的表达,抑制肝癌细胞的增殖;miR-369-3p可以通过负调控Bcl-2蛋白、正调控Bax蛋白的表达,从而促进肝癌细胞的凋亡。
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