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目的:不同浓度氟化钠(Na F)对H9c2心肌细胞进行染毒培养,研究AMPK参与线粒体通路介导的氟对H9c2心肌细胞毒性损伤的机理。方法:H9c2心肌细胞经不同浓度Na F作用48h和72h后,采用MTT法对细胞增殖进行研究;运用HE染色法观察心肌细胞的形态变化;采用流式细胞术观测氟对细胞线粒体膜电位(ΔΨm)和细胞早期凋亡率的影响;实时荧光定量PCR法检测凋亡途径(线粒体途径)中的重要基因(caspase-3、caspase-9和Cyt c)以及AMPKα的m RNA表达量;Western blot法检测AMPKα蛋白磷酸化表达水平。结果:实验结果显示,低剂量的氟对细胞的增殖没有明显影响,随Na F浓度的逐渐增大,氟对细胞增殖的抑制作用逐渐增强,细胞形态呈现较明显的变化,细胞间的相互连接逐渐消失,细胞膜变得模糊不清。在20 mg/L Na F作用下,细胞核开始发生碎裂,胞核中染色质聚集。在40mg/L Na F作用下,细胞间连接几乎完全丧失,细胞外观形态扭曲,轮廓模糊;经Na F作用后,心肌细胞JC-1探针绿色荧光呈上升趋势,说明氟会导致心肌细胞ΔΨm下降;细胞早期凋亡率随Na F浓度的增大也呈上升趋势,与ΔΨm的变化共同说明氟会导致H9c2心肌细胞发生凋亡;随Na F剂量的增大,各实验组caspase-3、caspase-9和Cyt c m RNA表达量与正常对照组比较均呈现上升趋势;且心肌细胞AMPKαm RNA表达量逐渐增多;对照组心肌细胞p-AMPKα与AMPKα灰度值差别不是很大,随Na F剂量的逐渐增大,p-AMPKα与AMPKα灰度值比值总体呈现上升趋势。结论:细胞凋亡参与了氟诱导H9c2心肌细胞毒性的损伤过程;氟诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用机制与激活线粒体通路有关;AMPK参与了氟致H9c2心肌细胞的损伤过程。