水稻花器官形成一直是水稻遗传改良工作者关注的重点。从水稻品种明恢86的辐射诱变的后代植株中发现了一种营养生长、开花时间、花序形成均正常,但其小穗发育明显异常的突变体。除外稃发育正常外,该突变体小穗的其它花器官均明显异常,其花分生组织的决定性丧失,在大部分小穗的中央长出一个穗状的结构。此前,本实验室已将该基因初步定位在第8号染色体上约250 kb的区域内。在此基础上,本研究扩大了定位的F2群体,对该基因进行精细定位,确定了候选基因,并对候选基因的功能和表达进行初步分析。主要结果如下:(1)OsRBR1的精细定位。以突变杂合体和DZ60为亲本,构建了一个精细定位的F2大群体,共筛选到1148个突变体表型的植株,将该基因定位在水稻第8号染色体长臂末端的ID4和ID5之间约32 kb的区间内,在此区域内共预测到五个基因。测序分析表明,突变体在OsRBR1基因的第11个外显子缺失了 28个碱基,而其余四个基因的序列在突变体与野生型间无差异。因此,将OsRBR1确定为候选基因,该突变体命名为Osrbr1-1。(2)OsRBR1的功能分析。构建了一个全长8574 bp的OsRBR1基因的互补载体pBWA(v)H-OsRBR1,将该载体转化Osrbr1-1突变体种子诱导的愈伤组织中,目前已获得了一批转基因植株;构建了一个由Ubi启动子驱动的OsRBR1基因过表达载体Ubi:OsRBR1,将该载体转化中花15诱导的愈伤组织中,目前已分化出8个转基因株系。待这些转基因植株抽穗后再进行表型鉴定,分析互补实验与过表达实验的结果,以明确OsRBR1基因的功能。(3)OsRBR1的表达分析。利用生物信息学方法确定了OsRBR1基因的启动子序列,构建了一个由OsRBR1启动子驱动的GUS表达载体pOsRBR1:GUS,将该载体转入中花15的愈伤组织中,目前已分化出15个株系,其中9个为转基因株系。下一步将进行GUS表达分析实验。