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目的:探讨拮抗大鼠内源性N/OFQ受体对早期（15min内）急性心肌缺血大鼠室性心律失常的影响。探讨通过拮抗大鼠内源性N/OFQ受体（利用特异性N/OFQ受体拮抗剂UFP-101）是否会改变早期急性心肌缺血大鼠缺血区心肌组织内RKIP的磷酸化水平。探讨内源性孤啡肽受体是否通过影响RKIP的磷酸化水平来对急性心肌缺血大鼠缺血区心肌细胞膜表面β1-AR产生调控作用。方法:第一部分:拮抗内源性孤啡肽受体对早期（15min内）心肌缺血大鼠心律失常的影响成年雄性SD大鼠30只,体重约250g左右,按随机数字表法平均分为三组每组10只,分别为Sham组（假手术组,该组大鼠只开胸,不结扎冠状动脉）;CAO组（冠脉结扎组,该组大鼠开胸并结扎冠状动脉）;UFP-101组(开胸并结扎冠状动脉,浓度10-9mol/L UFP-101按1ml/kg负荷量术前经尾静脉注射)。各组大鼠建立相应模型,观察并记录其术前10min至心肌缺血后15min内室性心律失常数据。第二部分:拮抗内源性孤啡肽受体对早期急性心肌缺血大鼠缺血区心肌组织内RKIP磷酸化程度的调控取第一部分实验中的各组大鼠术后15min时缺血区心肌组织,提取蛋白组织并行BCA蛋白定量,利用Western-Blot技术检测各组大鼠心肌组织磷酸化RKIP（pRKIP）及总RKIP的表达。第三部分:心肌组织RKIP上调大鼠模型的建立与室性心律失常的发生情况雄性SD大鼠30只,体重100-150mg,按随机数字表法平均分为三组每组10只,分别为RKIP上调组（简称Did组）;RKIP上调+RKIP抑制组（简称Did+Loc组）;空白对照组（CK组）。其中Did组与Did+Loc组两组大鼠每日腹腔注射RKIP非特异性上调剂didymin（香蜂草苷,玉米油溶）,负荷量5mg/kg×d,而CK组大鼠每日腹腔注射等体积玉米油,连续4周。4周后各组大鼠行冠状动脉结扎术,其中Did+Loc组大鼠术前两小时腹腔注射RKIP特异性拮抗剂Locostatin（洛法他丁,玉米油溶）。各组大鼠术前10min均尾静脉注射UFP-101(10-9mol/L,1ml/Kg),术前10min至术后15min记录各组大鼠心律失常数据。术后15min取各组大鼠心室肌相同部位心室肌组织与缺血区心肌组织,检测各组大鼠相同部位心肌组织总RKIP与pRKIP的表达,以验证各组模型制作成功与否。第四部分:探讨大鼠心肌组织RKIP的上调是否影响孤啡肽对心肌细胞膜表面β1-AR的表达取第三部各组大鼠缺血区心肌组织,提取质膜表面蛋白,利用Western-Blot技术检测各组大鼠心肌质膜表面β1-AR的表达量。结果:1.拮抗内源性孤啡肽受体对早期（15min内）心肌缺血大鼠心律失常的影响Sham组,UFP-101组,CAO组大鼠均出现了不同程度的室性心律失常。与Sham组相比,CAO组大鼠室性早搏（VEB）,室性心动过速（VT）与心室纤颤（VF）发生率及持续时间以及心律失常评分显著上升（P<0.05或P<0.017）;与CAO组相比,UFP-101组VEB发生次数、VT+VF发生次数及持续时间以及心律失常评分均明显下降（P<0.05或P<0.017）。2.拮抗内源性孤啡肽对早期急性心肌缺血大鼠缺血区心肌组织内RKIP磷酸化程度的调控与Sham组相比,CAO组pRKIP的相对表达明显升高（P<0.05）,UFP-101组pRKIP的相对表达有所下降（P<0.05）;三组大鼠缺血区心肌组织总RKIP的表达没有明显差异（没有统计学意义）。3.心肌组织RKIP上调大鼠模型的建立与室性心律失常发生情况与CK组大鼠相比,Did组与Did+Loc组VEB发生次数明显升高（P<0.05）,与Did组相比,Did+Loc组VEB发生次数明显下降（P<0.05）;与CK组相比,Did组大鼠VT+VF的发生次数与持续时间都明显升高（P<0.017）,Did+Loc组大鼠VT+VF发生次数、持续时间没有明显统计学差异,与Did组相比,Did+Loc组VT+VF发生次数,持续时间也均减少,但没有明显统计学差异;与CK组相比,Did组心律失常评分升高（P<0.017）,Did+Loc组心律失常评分没有明显统计学差异,与Did组相比,Did+Loc组心律失常评分降低（P<0.017）。与CK组相比,Did组Did+Loc组总RKIP的相对表达明显增高（P<0.05）,Did组与Did+Loc组间总RKIP表达没有统计学差异;与CK组相比,Did组与Did+Loc组p-RKIP的相对表达明显升高（P<0.05）,与Did组相比,Did+Loc组p-RKIP的相对表达有所降低（P<0.05）4.探讨大鼠心肌组织RKIP的上调是否影响孤啡肽对心肌细胞膜表面β1-AR的表达与CK组相比,Did组与Did+Loc组缺血区心肌细胞膜表面β1-AR的表达明显上调（P<0.05）;但与Did组相比,Did+loc组大鼠心肌膜表面β1-AR的表达有所下调（P<0.05）。结论:拮抗内源性N/OFQ受体减少大鼠急性心肌缺血导致的室性心律失常,影响缺血心肌组织内RKIP磷酸化水平,并且可能通过调控RKIP的磷酸化水平来影响缺血心肌细胞膜表面β1-AR的表达水平。