产酶溶杆菌（Lysobacter enzymogenes）OH11是由本实验室从辣椒根际土壤中分离得到的一种新型生防菌，属溶杆菌属（Lysobacter）、黄单胞科(Xanthomonadaceae)。该菌GC含量较高，有滑行现象，能产生多种胞外酶，包括几丁质酶、蛋白酶、纤维素酶、β-1，3-葡聚糖酶，此外，产酶溶杆菌可以产生许多重要的此生代谢产物，来抑制或者杀死病原物来发挥其生防作用，因此，产酶溶杆菌对许多植物病原真菌、卵菌具有很好的拮抗活性。本研究旨在明确产酶溶杆菌OH11是否存在DSF(diffusible signalfactor)型群体感应现象，以及DSF型群体感应如何发挥其作用的，与其他黄单胞科细菌rpfF基因功能的异同。　　 利用NCBI数据库中的黄单胞科细菌的基因组信息，结合同源比对的方法，首次在产酶溶杆菌OH11中发现了与DSF合成相关的rpf（regulation of pathogenicity factors）基因簇。序列和结果分析表明，产酶溶杆菌OH11的rpf基因与黄单胞细菌rpf因簇具有较高的同源性和相似的保守区域，这一结果表明产酶溶杆菌OH11可能与其他黄单胞细菌具有相同的功能，为了明确产酶溶杆菌rpf基因簇的功能，我们对其中两个重要的基因rpfF和rpfG进行了定向敲除。　　 在黄单胞科细菌中，DSF型QS系统具有重要的生物学功能，如:可以调控病菌在寄主上的致病性，病菌致病因子（如胞外酶和胞外多糖）的产生、生物膜形成、游动性等重要性状。产酶溶杆菌（Lysobacter enzymogenes）在分类地位上与植物黄单胞菌（Xanthomonas spp.）均属于黄单胞科（Xanthomonadaceae），但该菌为一种生防细菌，不具有致病性。在rpf基因簇中，rpfF基因主要负责DSF信号分子的合成，在rpf基因簇中发挥着重要的作用。将产酶溶杆菌OH11的rpfF基因导入到Xcc△rpfF中，结果发现rpfFLys基因可以恢复Xcc由于rpfF基因突变引起的蛋白酶活性下降和DSF产量下降的情况。这一结果表明，rpfFLys与其他黄单胞科细菌一样，是一个功能性的基因。为了深入了解产酶溶杆菌中rpfF的功能，对其进行了敲除和互补。与野生型相比，rpfF基因的突变降低产酶溶杆菌重要抗真菌物质——热稳定抗菌因子HSAF的产量和对腐霉的拮抗活性，高效液相色谱和荧光定量PCR与HSAF活性检测和腐霉拮抗结果相吻合;降低了WAP的产量，从而降低了对马铃薯环腐病的拮抗。除此之外，对野生型和rpfF突变体进行了基因芯片实验。基因芯片结果表明rpfF基因缺失会影响337个基因的表达。然而，rpfF的突变不改变产酶溶杆菌4种胞外抗菌水解酶的活性。有趣的是，rpfF突变导致产酶溶杆菌菌落表面干燥，但滑行能力提高。　　 在黄单胞科细菌中存在着rpfC/rpfG组成的双组份系统，用于植物黄单胞菌群体感应信号分子DSF的感知和传递。其中，rpfG负责DSF在胞内传递，具有调控黄单胞菌致病性的功能。为探索rpfG在产酶溶杆菌中功能，我们以OH11为研究对象，通过同源比对，在OH11基因组中鉴定出rpfG的同源基因，命名为rpfGLys。利用同源重组技术，对rpfG基因进行了定向敲除，获得了rpfG的缺失突变株。与野生型相比，rpfG基因的突变降低产酶溶杆菌重要抗菌物质——热稳定抗菌因子HSAF的产量和对腐霉的拮抗活性。荧光定量PCR显示在rpfG突变株中负责生物合成HSAF的关键基因PKS/NRPS显著下调，与HSAF活性检测结果相吻合。然而，rpfG的突变不改变产酶溶杆菌4种胞外抗菌水解酶的活性。另外，rpfG突变导致产酶溶杆菌菌落表面干燥，但滑行能力提高。