论文部分内容阅读
(第一部分)PD-1单核苷酸多态性与食管胃结合部腺癌风险的关联性研究:一个大型病例对照研究背景:食管胃结合部腺癌（Esophagogastric junction adenocarcinoma,EGJA）的发病率在欧洲和北美逐年上升的,东亚的EGJA发病率也是如此。在我国,EGJA是一种高死亡率的癌症。EGJA的病因流行病学研究认为食用腌制食品,吸烟和肥胖等都可能是EGJA的重要危险因素,但是这些常见的环境危险因素不能解释所有的病因。个体的遗传因素可能影响EGJA的发病。目的:研究PD-1基因多态性与EGJA的易感性的关联性。方法:我们招募了2740个参与者。其中,EGJA患者1063个,非肿瘤对照1677个。我们使用SNPscan的方法来检测PD-1 rs7421861 A>G,rs10204525 T>C,rs2227982A>G and rs36084323 T>C的基因型。单倍体型我们使用在线SHESIS软件进行构建。数据统计使用SAS9.4软件。统计学的显著性差异定义为P<0.05（双尾）。结果:PD-1 rs7421861 A>G（PD-1.7）位点显著增加了EGJA的发病风险,具有关联性。但是,PD-1 rs2227982 A>G（PD-1.9）则可能是EGJA发病风险的保护性因素。我们发现PD-1 rs36084323（PD-1.1）CC基因型可能与降低的EGJA相关,但未达统计学差异。分层分析提示PD-1 rs36084323 CC基因型在未吸烟和未饮酒的亚组中与降低的EGJA风险相关。PD-1单倍体型构建的结果提示我们Trs10204525Grs2227982C36084323Ars7421861可能降低EGJA的发病风险,而PD-1Trs10204525Grs2227982C36084323Grs7421861单倍体型则与显著增加的EGJA风险相关。结论:PD-1多态性和单倍体型都与EGJA风险有显著的相关性。（第二部分）PD-1多态性影响血浆多种细胞因子水平的研究背景:既往有数项研究报道了细胞毒性T淋巴细胞抗原-4基因多态性可以影响IL-2的分泌水平。PD-1与细胞毒性T淋巴细胞抗原-4功能十分相似,故其多态性位点可能会影响多种细胞因子的表达。目的:评估PD-1基因多态性与EGJA患者血浆多种细胞因子的水平的相关性。方法:纳入了85例初治的EGJA患者和93例健康对照。我们测定血浆IL-2、IL-4、IL-6和IL-17A细胞因子。分析这些细胞因子和PD-1基因多态性不同基因型的相关性。结果:（1）PD-1 rs2227982 A>G位点有增高EGJA淋巴结转移阳性亚组和III/IV期亚组血浆IL-2水平的趋势;PD-1 rs2227982 A>G位点也与对照组增高的血浆IL-6水平相关。（2）PD-1 rs7421861 A>G多态性可能降低淋巴结转移阳性亚组血浆IL-4水平。（3）PD-1 rs36084323 T>C基因多态性有增高对照组血浆IL-6水平的趋势。结论:PD-1基因多态性可能改变血浆多种细胞因子的水平。（第三部分）PD-1多态性影响肿瘤浸润性淋巴细胞表面PD-1的表达的研究背景:许多的研究结果表明PD-1表达在肿瘤浸润性淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes,TILs）上面。PD-1的表达和肿瘤的分化程度,淋巴结转移和分期相关,与肿瘤的预后亦相关。目的:我们拟在前两部分研究的基础上进行PD-1基因多态性与EGJA患者TILs表面的PD-1蛋白的表达水平的相关性研究。方法:此部分研究我们纳入了84例手术治疗的EGJA患者,通过免疫组化染色的方法研究EGJA肿瘤组织中TILs表达PD-1的情况。同时与前期研究获得的PD-1基因多态性阳性位点的不同基因型进行匹配比对,探讨PD-1 SNPs对EGJA肿瘤组织中TILs表达PD-1表达的影响。结果:低分化EGJA病例组中TILs表面PD-1表达评分显著高于中高分化EGJA组的评分。按不同的基因模型进行比较进行,结果发现PD-1 rs36084323 T>C和PD-1 rs2227982 A>G基因多态性与降低的PD-1表达评分相关（P<0.05）。而PD-1rs7421861 A>G基因多态性未发现与PD-1表达相关（P>0.05）。结论:PD-1 rs36084323 T>C和PD-1 rs2227982 A>G基因多态性可能降低TILs表面的PD-1表达水平。