PRMT5通过Wnt通路影响小鼠肾脏发生发育的实验研究

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目的通过观察小鼠肾脏不同发生发育期PRMT5、β-Catenin的表达水平,探讨PRMT5、β-Catenin对小鼠肾脏发生发育的影响作用,为进一步讨论初期肾单位发生提供实验依据。方法1、采用免疫组化PV法检测PRMT5、β-Catenin在选取的不同胚龄(E)14、16、18d胎鼠和生后不同日龄(N)1、7、14、21和42d仔鼠肾脏组织标本中的表达情况,进一步观察和分析PRMT5、β-Catenin在小鼠不同胚龄、生后日龄肾组织中的表达部位及二者在肾组织中表达的相关性。2、应用RT-PCR技术分别检测PRMT5、β-Catenin在不同胚龄(E)14、16、18d胎鼠和生后不同日龄(N)1、7、14、21和42d仔鼠肾脏组织中的m RNA表达。3、应用Western Blot技术分别检测PRMT5、β-catenin在不同胚龄(E)14、16、18d胎鼠和生后不同日龄(N)1、7、14、21和42d仔鼠肾脏组织标本中的蛋白表达,从而分析各组PRMT5、β-Catenin基因表达的变化及其与肾发生发育的关系。结果1、PRMT5、β-Catenin基因从E14d开始在输尿管芽有表达。而后伴随着肾脏逐渐发育成熟,β-Catenin主要表达于远端小管和集合管,在近端小管少见表达,肾小体中无阳性表达;PRMT5主要表达于远端小管,近端小管和肾小体中少见表达。2、RT-PCR、Western Blot结果显示:在小鼠肾脏发生发育的不同阶段肾组织中,从E14d至N1d,PRMT5、β-Catenin在肾脏的表达量逐渐增加,而从N1d至N42d表达量逐渐减少。3、在小鼠肾脏发生发育的不同阶段,β-Catenin与PRMT5在肾组织中的表达趋势基本一致,二者呈显著正相关(r=0.806,P<0.001)。结论在小鼠肾脏发生发育的不同阶段,PRMT5和β-Catenin主要表达于远端小管,在近端小管少见表达。相关分析表明,β-Catenin与PRMT5在肾发育不同阶段的表达趋势基本一致,二者呈显著正相关,提示:PRMT5可能通过Wnt/β-Catenin信号通路影响小鼠肾脏的发生发育。
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