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第一部分:含MMT汽油对加油站工人外周血氧化应激及Hsp70蛋白的影响目的:了解含甲基环戊二烯三羰基锰(Methylcyclopentadienyl ManganeseTricarbony, MMT)汽油对加油站工人外周血氧化应激、热应激蛋白70(Heatstress proteins, Hsp70)的影响,探讨含MMT汽油对加油站工人健康损害的早期敏感指标。方法:采用横断面调查方法,以广西南宁四个城区某企业的9家加油站工人为研究对象,将一线加油员作为暴露组,以行政人员等辅助工作为对照组。采用职业流行病学调查问卷,收集研究对象的人口学特征、吸烟饮酒史、既往疾病史、服药情况及职业史等资料,计算加油站工人的锰累积暴露指数(Cumulative exposure index, CEI)和混苯CEI,并检测所有研究对象的外周血氧化应激及Hsp70水平。同时对上述9家加油站作业环境中空气锰、苯系物浓度进行环境监测。结果:1.本研究纳入加油站工人144人。对照组48人,其中男性13人,女性35人,年龄范围为23~47岁,平均年龄(33.0±5.9)岁,工龄范围为1.7~21.7年,平均工龄(9.8±5.9)年。暴露组96人,其中男性32人,女性64人,年龄范围为20~54岁,平均年龄(33.8±7.2)岁,工龄范围为1.0~13.7年,平均工龄(7.7±4.2)年。除了文化程度和工龄外,暴露组与对照组的性别构成、年龄、民族、婚姻状况、吸烟率及饮酒率等差异均无统计学意义(P>0.05)。2.一共采集空气锰样品86份,苯系物样品36份,合格率为100%。加油区空气中锰时间加权平均浓度(Time weighted average, TWA)范围为6.44~127.34μg/m3,办公区空气中锰浓度(TWA)范围为3.16~7.22μg/m3,加油区空气锰浓度明显高于办公区,但均低于国家规定的职业接触限值150μg/m3。加油区空气中苯、甲苯、乙苯及二甲苯浓度(TWA)范围分别为19.86~202.42μg/m3、77.09~886.53μg/m3、7.59~102.85μg/m3、36.21~521.57μg/m3,办公区空气中苯浓度(TWA)范围分别为2.31~29.36μg/m3、2.32~177.86μg/m3、1.26~45.95g/m3、4.02~182.57μg/m3,加油区苯系物浓度明显高于办公区,但均分别低于国家规定的职业接触限值6×103μg/m3、50×103μg/m3、50×103μg/m3及100×103μg/m3。3.暴露组血浆总超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物岐化酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px)活力分别为(39.18±6.05)U/ml、(186.07±15.63)U,均低于对照组的(52.84±3.87) U/ml、(194.38±10.42)U(P<0.05),且随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈下降趋势。暴露组血浆丙二醛(Malondialdehyde, MDA)含量为(1.68±0.52) nmol/ml明显高于对照组的(1.43±0.64) nmol/ml (P<0.05),且随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈上升趋势。4.暴露组血浆Hsp70蛋白含量(2.77±0.64) ng/ml高于对照组的(2.32±0.87)ng/ml (P<0.05)。按工龄分层后,工龄>10年时暴露组的血浆Hsp70蛋白含量为(3.05±0.66)ng/ml,明显高于对照组的(2.37±0.89)ng/ml(P<0.05),且Hsp70蛋白表达水平随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈上升趋势。此外,Pearson相关分析结果显示,暴露组血浆Hsp70蛋白表达水平与SOD、GSH-Px活力之间呈负相关性,相关系数分别为-0.305、-0.302(P<0.05);暴露组血浆Hsp70蛋白含量与MDA含量之间呈正相关性,相关系数为0.653(P<0.05)。结论:1.含MMT汽油可引起加油站工人机体抗氧化能力下降,脂质过氧化水平升高,且SOD、GSH-Px活力随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈下降趋势,MDA含量随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈上升趋势,提示SOD、GSH-Px和MDA可作为加油站职业人群氧化应激损伤的早期监测参考指标。2.含MMT汽油可引起加油站工人血浆Hsp70蛋白表达水平增加,且随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈上升趋势,提示Hsp70可考虑作为加油站职业人群健康损害的早期敏感指标。第二部分:含MMT汽油对加油站工人认知功能的影响目的:了解含MMT汽油对加油站工人认知功能的影响,分析外周血氧化应激、Hsp70蛋白水平与认知功能损伤的关联性。方法:采用蒙特利尔认知评估(Montreal Cognitive Assessment, MoCA)量表对第一部分的研究对象进行神经认知功能测试,并对神经认知功能测试得分与外周血氧化应激、Hsp70蛋白表达水平之间进行关联性分析。结果:1.暴露组抽象能力得分、记忆力得分、MoCA总分依次为(0.90±0.07)分、(2.75±0.14)分、(23.08±0.28)分,均依次低于对照组的(1.28±0.10)分、(3.32±0.21)分、(24.36±0.41)分,差异均具有统计学意义(P <0.05)。按性别分层后,暴露组女工抽象能力得分、记忆力得分、MoCA总分依次为(0.81±0.10)分、(2.43±0.21)分、(22.70±0.41)分,均依次低于对照组女工的(1.36±0.14)分、(3.33±0.34)分、(24.42±0.66)分,差异均具有统计学意义(P<0.05)。按工龄分层后,在工龄>10年时暴露组抽象能力得分、记忆力得分、MoCA总分依次为(0.88±0.11)分、(2.40±0.20)分、(22.62±0.42)分,均依次低于对照组工人的(1.40±0.15)分、(3.65±0.27)分、(24.52±0.59)分,差异均具有统计学意义(P<0.05)。偏相关分析结果显示,锰CEI与记忆力得分、MoCA总分之间呈负相关性,偏相关系数分别为-0.201、-0.185;混苯CEI与记忆力得分、MoCA总分之间亦呈负相关性,偏相关系数分别为-0.196、-0.220,差异均具有统计学意义(P <0.05)。2.暴露组加油站工人血浆Hsp70蛋白表达水平与加油站工人的MoCA总分呈负相关(r=-0.477,P=0.019)。结论:1.含MMT汽油可引起加油站工人的认知功能损伤,表现为记忆力减退,抽象能力下降,且认知功能损伤程度随工龄、锰CEI、混苯CEI的增加而呈加重的趋势。2. Hsp70蛋白表达水平与认知功能损伤之间存在负相关,其表达水平的增加与保护神经细胞免受苯系物和锰联合刺激引起的脂质过氧化损伤有关,这可能与苯系物、锰神经毒性作用机制有潜在的关联。