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SAMHD1是真核生物基因编码的一种蛋白质。它是一种天然的抗病毒因子,具有d NTPase活性,能够降低细胞内的d NTPs水平,从而能够抑制病毒的复制。并且SAMHD1在生物体内含量丰富,在人体内的很多组织中均有表达,是一种丰富度较高的蛋白。SAMHD1不仅能够抑制病毒的复制,而且在很多肿瘤细胞中表达的SAMHD1也会消耗细胞内的d NTPs,从而起到抑制肿瘤细胞增殖的作用。但在肿瘤细胞中,SAMHD1通常会发生突变,这一突变将会影响它的活性,进而影响它的抗肿瘤作用,而且它的表达量也会有不同程度的降低。通过比较结肠癌中的五种单一位点突变体与野生型(109aa-626aa),我们发现,发生突变的SAMHD1依然能够在原核生物中表达,只是可溶性发生了不同程度的变化,虽然以包涵体形式表达的蛋白占大部分,但通过扩大培养,仍然可以得到足够量的可溶性蛋白用于纯化和后续的结构方面的研究。在一定条件下,在适量的纯化后的SAMHD1及其突变体中加入底物d GTP后,反应一段时间,通过高效液相色谱法测定SAMHD1及其突变体的活力,我们发现,结肠癌中SAMHD1相关突变体其d NTPase活性大部分几乎完全丧失,这极有可能是造成它不能抑制肿瘤细胞增殖的原因。相关报道表明,SAMHD1可以抑制逆转录元件LINE-1的转座,而这一功能与肿瘤的发生也密切相关。通过在细胞中共转染LINE-1及SAMHD1及其突变体质粒,我们发现,突变后的SAMHD1对LINE-1的抑制能力降低,这可能是导致肿瘤发生的一个因素。之前对SAMHD1的研究结果还表明,SAMHD1的抗病毒作用可以被HIV-2/SIV的附属蛋白Vpx抑制,Vpx通过招募E3泛素复合物,使SAMHD1发生泛素化,从而被蛋白酶体降解。在SAMHD1及其相关结肠癌突变体的研究中,我们发现SAMHD1及其突变体在与Vpx互作方面,除了D497Y,和野生型一样,依然可以被Vpx降解。这可能是由于D497Y距Vpx互作区比较近,其突变引发的构象改变导致了其不能被Vpx降解。本文通过对结肠癌中的SAMHD1五种突变体进行研究,主要研究突变后的SAMHD1和野生型的SAMHD1相比在消耗细胞内d NTPs的差异,也就是SAMHD1的酶活性的差异,以及被Vpx降解的差异及对逆转录转座子LINE-1的影响。最终我们得到的一些数据,对于SAMHD1及其相关疾病突变体的功能深入研究提供了一些参考。