大泡性角膜病变水通道蛋白和Na<'+>,K<'+>-ATP酶表达变化

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目的:大泡性角膜病变(bullous keratopathy,BK)是由于各种原因导致角膜内皮功能失代偿引起的以角膜水肿,上皮水泡为特征的一种疾病。以往研究发现水通道蛋白(Aquaporin,AQP)和Na+,K+-ATP酶与角膜水转运有关,因此本实验通过研究水通道蛋白1(Aquaporin-1,AQP1)、水通道蛋白4(Aquaporin-4,AQP4)和Na+,K+-ATP酶在人大泡性角膜病变角膜中的表达部位及其变化,探讨其在大泡性角膜病变发生机制中的作用。   材料和方法:选取2005年8月~2006年5月收治于北京同仁医院眼科的大泡性角膜病变30例,男性16例,女性14例,年龄15-82岁,平均年龄50.3岁,起病原因分别为白内障摘除术、穿透性角膜移植、玻璃体切除术和抗青光眼术后26例和角膜内皮营养不良4例。北京同仁眼库提供的正常角膜2个及正常周边角膜20个。   (1)运用免疫荧光技术显示人大泡性角膜病变角膜和正常角膜中AQP1、AQP4和Na+,K+-ATP酶的表达部位。   (2)免疫印迹方法比较人大泡性角膜病变角膜和正常角膜中AQP1、AQP4和Na+,K+-ATP酶的蛋白表达差异。   结果:   (1)免疫荧光染色可见AQP1在正常和大泡性角膜病变(BK)角膜基质细胞和内皮细胞的细胞膜和细胞浆中均有阳性表达。并且BK角膜内皮细胞层变薄,细胞数较正常角膜明显减少甚至大段缺失,荧光信号明显弱于正常角膜内皮。AQP4在正常和BK角膜上皮层均有阳性表达,基质层均有弱阳性表达。Na+,K+-ATP酶在正常和BK角膜上皮层和内皮层均有阳性表达,基质层均有弱阳性表达,但BK角膜内皮层荧光信号比正常角膜弱。   (2)免疫印迹法显示BK角膜AQP1表达量升高而AQP4和Na+,K+-ATP酶表达量下降。   结论:本实验证实了AQP1、AQP4和Na+,K+-ATP酶在正常及大泡性角膜病变角膜均有表达并且其蛋白表达量均发生了明显变化,它们的异常表达可能与大泡性角膜病变的病理改变有一定关联。
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