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脱氧雪腐镰刀菌烯醇（Deoxynivalenol, DON），又名呕吐毒素，是一种由镰刀菌产生的二级代谢产物。DO N广泛存在谷物中，人和畜禽采食被污染的谷物、饲料极易引起呕吐、腹泻、消化吸收抑制、脏器损伤、生长性能和免疫力下降等。肠道作为维护机体健康的天然屏障，是DO N产生机体毒性作用的第一攻击对象，不仅破坏肠道免疫系统，而且影响小肠消化吸收，干扰葡萄糖、蛋白质等营养物质的吸收和消化代谢，抑制转运载体活性，从而引起动物营养不良、体重下降、免疫力低下和疾病发生等。 肠道微生态系统（Intestinal flora）是机体最重要的组成部分，参与营养物质的代谢、消化、吸收以及机体的生长发育和免疫防御。通常肠道菌群与宿主保持动态平衡，主要集中在大、小肠部位，且不同区域微生物组成存在差异。 近年来，DON对肠道系统的影响主要集中在肠道上皮的损害以及免疫功能的破坏。然而肠道微生物作为与机体共生的统一体，DON是否对其也能产生毒性作用，进而引起营养物质吸收、代谢障碍及机体损伤，目前国内外还未曾报道。 因此，本试验采用MiSeq高通量测序技术研究DON对BALB/c小鼠肠道微生物群落结构的影响，并通过消化吸收试验、小肠相关转运载体基因表达情况，探讨DO N对 BALB/c小鼠的毒性作用，是否通过肠道菌群结构平衡破坏引起营养物质吸收、代谢障碍途径产生，为进一步揭示DO N的毒性作用机制提供新的线索和试验参考。 本文主要试验内容和结果如下： 选取6周龄BALB/c雄性小鼠48只分为4组，每组12只，实验室条件下分别灌胃0、0.2、0.6、1.8 mg/kg.bw剂量DON，试验持续28 d。 （一）DON致小鼠肠道微生物群落结构变化的宏基因组学研究。结果显示：粪便和盲肠内容物中拟杆菌门（Bacteroidetes）和厚壁菌门（Firmicutes）占比均超过90％。与对照组相比，1.8 mg/kg.bw DON剂量组拟杆菌门、变形菌门（Proteobacteria）丰度显著降低（P<0.05），脱铁杆菌门（Deferribacteres）丰度显著升高（P<0.05）；厚壁菌门、疣微菌门（Verrucomicrobia）丰度升高，统计差异不显著（P>0.05）。属层次上，DON剂量组中双歧杆菌（Bifidobacterium）和嗜热链球菌（Streptococcus）丰度下降，统计差异不显著（P>0.05）；梭菌属（Clostridium）、弧菌属（Vibrio）丰度显著升高（P<0.05）。 盲肠内容物菌群丰度分析：与对照组相比，DON剂量组拟杆菌门显著降低（P<0.05），疣微菌门（Verrucomicrobia）显著升高（P<0.05），厚壁菌门、变形菌门、脱铁杆菌门丰度增加，统计差异不显著（P>0.05）。属层次上，乳杆菌（Lactobacillus）含量较对照组显著降低（P<0.05），嗜热链球菌、双歧杆菌变化并不显著（P>0.05）；幽门螺杆菌（Helicobacter）、弧菌属丰度上升，统计差异均不显著（P>0.05）。结果表明，DON能显著改变肠道菌群结构、多样性和丰度，导致益生菌减少、致病菌增多。 （二）DON对肠道营养物质消化、代谢的影响。首先观察不同浓度 DON处理对小鼠体重、采食量和脏器系数的影响，后收集不同处理组小鼠粪便，分析DO N对粪便 pH值、水分等消化指标的影响。结果显示：与对照组相比，1.8 mg/kg.bw DON剂量组小鼠粪便pH比对照组显著升高（P<0.05），采食量显著降低（P<0.05），体重增重显著降低（P<0.05）；0.6 mg/kg.bw DON组肝、脾脏脏器系数与对照组显著下降（P<0.05），其余无统计学差异。1.8 mg/kg.bw DON剂量组含水量显著减少（P<0.05），粗蛋白、粗脂肪、粗纤维消化率显著降低（P<0.05），0.6 mg/kg.bw DON组粗脂肪、粗纤维消化率降低（P<0.05）；铜、铁、锌、镁消化率显著下降（P<0.05），其余统计差异不显著；缬氨酸（VAL）、赖氨酸（LYS）、丙氨酸（ALA）、脯氨酸（PRO）、酪氨酸（TYR）、天门冬氨酸（ASP）、亮氨酸（LEU）、异亮氨酸（ILE）、精氨酸（ARG）、苏氨酸（THR）、丝氨酸（SER）、谷氨酸（GLU）、甘氨酸（GLY）、苯丙氨酸（PHE）、组氨酸（HIS）的消化率都显著下降（P<0.05）；0.6 mg/kg.bw DON组氨基酸消化率也下降，0.2 mg/kg.bw DON组氨基酸消化率无统计学差异。1.8 mg/kg.bw DON剂量组血清总胆固醇（Total cholesterol, TC）、甘油三酯（Total triglyceride, TG）含量显著下降（P<0.05），高、低密度脂蛋白（High density lipoprotein, Low density lipoprotein;HDL, LDL）含量下降，但统计差异不显著（P>0.05）；0.6 mg/kg.bw DON组胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量降低显著（P<0.05），其余统计差异不显著。结果表明，DON能显著抑制小肠消化吸收率，并与微生物变化相关。 （三）DON对小肠相关营养物质转运载体基因表达影响的研究。采用 Real time-PCR技术测定了小肠寡肽转运载体基因PepT1、氨基酸转运载体基因 rBAT、CAT1、LAT1、、y+LAT2和EAAT3的表达情况。结果显示：与对照组相比，1.8 mg/kg.bw DON剂量组小鼠十二指肠中 PepT1、rBAT、CAT1、LAT1、y+LAT2和EAAT3的表达都显著降低（P<0.05），0.6 mg/kg.bw DON剂量组中PepT1、LAT1、rBAT、y+LAT2的相对表达量较对照组显著降低（P<0.05），0.2 mg/kg.bw DON剂量组中LAT1、y+LAT2表达显著降低（P<0.05）。1.8 mg/kg.bw DON剂量组空肠、回肠中除EAAT3外都显著降低（P<0.05）；EAAT3呈下降趋势，但统计差异不显著（P>0.05）。另外，0.2、0.6 mg/kg.bw DON剂量组空肠中LAT1表达降低（P<0.05）；0.2、0.6 mg/kg.bw DON剂量组回肠中rBAT和LAT1表达显著降低（P<0.05），其余统计差异不显著。结果表明，DON通过抑制寡肽、氨基酸转运载体基因的表达抑制肠道消化吸收。