论文部分内容阅读
第一部分槲皮素对抗慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞过度增殖的作用目的:研究食物中一种主要的黄酮类物质——槲皮素对抗慢性饮酒引起胃黏膜过度增生的作用及其机制。方法:40只雄性SD大鼠（200～250g）随机分为4组:对照组（饮用自来水）、酒精处理组（以6%酒精作为唯一饮用水来源）、槲皮素处理组（每天100mg/kg槲皮素灌胃）和酒精+槲皮素组（饮酒的同时每天100mg/kg槲皮素灌胃）。免疫印迹法测定增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表达以检测大鼠胃黏膜的细胞增殖。TBARS水平、蛋白羰基含量被用来作为胃黏膜氧化损伤的指标。硝酸盐/亚硝酸盐水平、硝基酪氨酸水平被用来检测胃黏膜NO的产生量。同时也用免疫印迹法检测了iNOS和nNOS的表达。结果:和对照组相比,酒精处理7天的大鼠胃黏膜细胞增殖显著增加,同时伴有脂质过氧化和蛋白质氧化水平增高、NO产生量降低和nNOS活性降低。这些作用可被槲皮素部分反转。结论:槲皮素可对抗慢性饮酒引起的胃黏膜细胞过度增生。这种作用是其消除自由基引起的,此外,还可能与其增强nNOS活性、增加NO产生有关。第二部分外源性间充质干细胞在损伤胃黏膜内的增殖及其作用目的:研究体外培养和扩增的骨髓间充质干细胞（bone marrowmesenchymal stem cells,BMMSCs）对损伤胃黏膜修复的促进作用。方法:体外培养扩增β-gal转基因小鼠的骨髓MSCs细胞。健康雄性C57BL/6小鼠（体重18～22g）,90只,随机分为对照组和实验组,实验组又分为移植和非移植组,每组30只。实验组用0.2ml纯酒精灌胃,造成胃损伤模型。酒精灌胃2 h后,移植组小鼠经尾静脉注射MSCs（0.5×106/只）;非移植组小鼠尾静脉注射和移植组同体积的PBS。对照组小鼠0.2ml生理盐水灌胃2 h后,经尾静脉注射MSCs（0.5×106/只）进行细胞移植。溃疡指数评分评价胃黏膜损伤的程度。免疫组化检测Brdu阳性细胞评价细胞增殖。β-gal阳性细胞评价MSCs细胞的数量及分布。Brdu-β-gal免疫双重染色评价MSCs细胞的增殖。植物血凝素UEA-1和β-gal双重染色评价MSCs细胞的分化。结果:MSCs移植后,在损伤胃黏膜可发现MSCs聚集于损伤部位,并大量增殖,可分化为胃黏膜上皮细胞;而在未损伤胃黏膜仅发现有少量MSCs细胞散在分布,未发现有MSCs细胞分化而来的胃黏膜上皮细胞。酒精诱导胃黏膜损伤后,MSCs移植组的损伤指数较未移植组显著降低。结论:静脉注射MSCs细胞可聚集于胃黏膜损伤部位,MSCs细胞可在损伤的胃黏膜内增殖分化并加快损伤胃黏膜的修复过程。