【摘 要】
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目的:MSCs（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）因具有低免疫原性及免疫抑制作用使其在移植免疫领域具有较高的研究及应用价值。此外,研究表明IFN-γ促进MSCs的免疫抑制作用。目前认为MSCs主要通过他们的旁分泌因子和宿主细胞的刺激修复发挥作用,而不是通过细胞置换。因为MSCs分泌了大量的生物活性蛋白,其中包括以微囊泡形式分泌的外泌体,具有生物活性成分。据此,我们通过外源添加
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目的:MSCs（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）因具有低免疫原性及免疫抑制作用使其在移植免疫领域具有较高的研究及应用价值。此外,研究表明IFN-γ促进MSCs的免疫抑制作用。目前认为MSCs主要通过他们的旁分泌因子和宿主细胞的刺激修复发挥作用,而不是通过细胞置换。因为MSCs分泌了大量的生物活性蛋白,其中包括以微囊泡形式分泌的外泌体,具有生物活性成分。据此,我们通过外源添加细胞因子IFN-γ刺激或无IFN-γ刺激（自然条件下）与MSCs共培养48h后收集MSCs的培养基,继而获得相应外泌体,以研究不同处理的外泌体对小鼠免疫排斥反应的影响。方法:原代分离、培养人脐带MSCs,并对其细胞免疫表型及分化功能进行鉴定;在加/不加IFN-γ的条件下分别培养MSCs,从MSCs的培养基中获取外泌体,并对其粒径和形态进行鉴定。以anti-CD3/CD28为刺激剂的淋巴细胞转化实验及混合淋巴细胞反应实验,检测不同处理的外泌体对淋巴细胞增殖的抑制作用;通过小鼠颈部套管法建立从供体小鼠BALB/C到受体小鼠C57BL/6的同种异体心脏移植模型,在体内研究外泌体对小鼠免疫排斥反应的影响。结果:从人脐带中易分离培养出大量MSCs,细胞纯度较高,形态均一且具有MSCs的形态特征和表面标志特征以及分化能力。在有/无细胞因子IFN-γ刺激的条件下均能从MSCs的培养基中稳定获取相应外泌体。体外淋巴细胞增殖实验结果表明,IFN-γ刺激MSCs后产生的外泌体较普通外泌体对淋巴细胞增殖的抑制作用更强。在体内实验中,IFN-γ刺激MSCs后产生的外泌体通过减少心脏移植物中炎性细胞的浸润和炎症因子的表达及降低脾脏中CD4+T细胞的比例和血清中IFN-γ的含量等方式减弱受体小鼠的免疫应答能力。结论:我们的研究表明IFN-γ刺激MSCs分泌的外泌体具有低免疫原性,通过抑制淋巴细胞增殖,从而减弱同种异体免疫排斥反应,保护心脏移植物。
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