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降香黄檀作为传统中药的药用部位是其根部和心材,含有大量的异黄酮类成分,而研究结果表明降香黄檀的可再生部位——叶子中也含有丰富的异黄酮类成分,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种活性,其中以鹰嘴豆芽素A和染料木素为代表。因此,本文建立了同时检测鹰嘴豆芽素A和染料木素的高效液相色谱(HPLC)分析方法,并以降香檀叶为原料,建立了微波辅助酶法提取叶子中鹰嘴豆芽素A和染料木素的提取工艺,并通过大孔吸附树脂、中压快速制备柱色谱等技术手段对降香檀叶中的两种异黄酮成分进行富集、分离,建立了一套完整的提取与分离降香檀叶中鹰嘴豆芽素A和染料木素的工艺。本研究为合理、高效的利用降香檀资源提供了科学依据,为我国降香资源的深度利用和开发提供了的数据支持。主要研究结果如下:1.建立了降香檀叶中鹰嘴豆芽素A和染料木素的HPLC分析方法。色谱柱:HIQ Sil C18V (250mm×4.6mm I.D.,5μim),流动相的为乙腈(A):0.1%甲酸水(B),梯度洗脱,条件为:0-5min,5-10%(A);5-10min,10-28%(A);10-30min,28-60%(A);30-35min,60%(A);35-37min,60-80%(A);37-42min,80-100%(A);42-55min,100%(A),流速:1.0mL/min,进样量:5μL,柱温:30℃,检测波长:260nm。2.通过响应面法考察了微波辅助酶提取法对降香檀叶中鹰嘴豆芽索A和染料木素提取率的影响,确定了最佳的提取工艺参数为:纤维素酶量:3.5mg/gpH值:5.2提取时间:15min提取温度:34℃微波功率:300W经以上筛选的优化条件处理后,降香檀叶中鹰嘴豆芽素A和染料木素的提取率分别为2.012和1.023mg/g,与热回流提取法相比提取率提高了17.45%,63.94%;与超声提取法相比提取率提高了5.07%,13.79%。3.确定了AL-2大孔吸附树脂快速富集鹰嘴豆芽素A和染料木素的工艺。大孔吸附树脂富集的最佳条件:树脂类型: AL-2型树脂与样品量的比:5:1在上述的最佳条件下,经过AL-2型大孔吸附树脂富集处理后,鹰嘴豆芽素A的含量从4.12%增加到27.20%,提高了6.60倍,收率为87.13%;染料木素的含量从1.06%增加到6.79%,提高了6.41倍,收率为84.60%4.通过中压快速制备柱色谱仪,将AL-2型大孔吸附树脂处理后的样品中的鹰嘴豆芽素A和染料木素分离出来,确定了中压快速制备柱色谱分离纯化降香檀叶中的鹰嘴豆芽素A和染料木素的工艺,最佳条件如下固定相类型:正相硅胶洗脱体系及洗脱条件:n-正己烷-乙酸乙酯体系;0-8min,n-正己烷-乙酸乙酯(10:1,v/v);8-35min,n-正己烷-乙酸乙酯(6:1,v/v)样品与硅胶量的比:1.3:40流速:50mL/min在上述的优化条件下,进过一次中压快速制箭柱色谱分离后,鹰嘴豆芽素A和染料木素的纯度能达到95%以上,该过程的收率分别为80.13%和73.11%。经过微波辅助酶提取、大孔吸附树脂富集、中压快速制备柱色谱分离等处理后,鹰嘴豆芽素A的纯度达到95%以上,总回收率为69.82%;染料木素的纯度也达到了95%以上,总回收率为61.85%,由1.3g富集后的产物可得到282.98mg鹰嘴豆芽素A和64.52mg染料木素;与传统的方法相比,该方法时间短、易于操作、环境污染较小,并且所得产品的纯度高、收率高,为大规模生产鹰嘴豆芽素A和染料木素提供了新工艺、新途径。