目的：分离培养上海地区粉尘螨和户尘螨，获得不同编码序列的重组尘螨二类变应原，并探讨其应用价值。 方法：从过敏性疾病患者床褥采集分离粉尘螨和户尘螨，控制培养温度在25±2~C，湿度75％，采用混合培养基和封闭式培养系统进行初步培养。在体视镜和生物显微镜下对成年螨的形态进行鉴定，并选用核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区2(ITS2)进行分子鉴定，双重鉴定确认螨种后即可进入大量培养。从成功的尘螨培养系统中分离单个孕螨进行隔离培养，获得纯种的尘螨种群。 用RT-PCR的方法扩增粉尘螨和户尘螨二类(Derf2和Derp2)编码基因，插入原核表达载体pET-19b，在大肠杆菌BL21(DE3)plysS内进行表达，所获得的重组蛋白用点印迹(DotBlot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其与鼠单抗及人群血清IgG的反应性；另用重组抗原免疫小鼠，用ELISA法检测鼠多抗与重组二类变应原抗原和天然尘螨粗抗原的反应性。 结果：采集分离粉尘螨和户尘螨，成功建立户尘螨培养系统，对尘螨种群进行“克隆化’’培养。获得14个户尘螨二类变应原(Derp2)基因核苷酸多样性位点，对应的两个重组变应原(rDerp2-I，rDer2-III)与鼠单抗7Al亲和力相似，而与鼠单抗1D8的亲和力不同，与上海地区人群IgG结合力相似(r=0．8526)；获得17个粉尘螨二类变应原(Derf2)基因核苷酸多样性位点，对应的两个重组蛋白(rDerf2-I，rDerf2-V)对鼠单抗1D8和7Al的亲和力相似，与上海地区人群IgG结合力相似(r=0．9774)。用重组抗原rDerp2-I和rDerf2-I免疫小鼠，所得多抗与重组抗原反应性好，与天然抗原也有一定反应性。 结论：成功培养粉尘螨和户尘螨；重组Derf2和Derp2具有免疫原性和免疫反应性；检测不同地区尘螨主要变应原的序列多样性，有助于开发更有针对性的疫苗组分，以及特异性保护性IgG的筛选。