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背景及目的:胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，转移扩散是患者预后不良的主要原因，严重威胁着人类的生命健康。因此，探讨与胃癌转移相关的因素，寻找有效、特异的转移相关基因并探讨其功能，不仅有利于阐明胃癌转移的分子机制，还能为临床诊治、药物筛选及预后判断提供新的靶点，具有特殊的重要性和迫切性。在本研究中，我们旨在探讨TIMP-3基因启动子区域5-CpG岛甲基化在胃癌侵袭转移及预后中的作用，并评估了术前腹腔冲洗液及血清标本中TIMP-3基因甲基化水平在胃癌转移中的诊断价值。
材料方法:
①采用real-time甲基化特异性-PCR(real-time methylationspecific-PCR, MSP)检测92例胃癌组织及配对的癌旁正常组织，48例胃炎患者及40例健康人胃组织中TIMP-3基因甲基化状态，分析癌组织TIMP-3基因甲基化与胃癌患者临床病理及预后的相关性;
②采用real-time MSP分别检测92例胃癌患者配对的术前血清和术前腹腔冲洗液标本中TIMP-3甲基化状态，分析血清和腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化与胃癌患者临床病理及预后的相关性，并分析血清和腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化与胃癌组织TIMP-3基因甲基化的相关关系。探讨术前血清和术前腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化检测在诊断胃癌转移及评估患者预后中意义。
结果:92例胃癌组织和癌旁正常组织TIMP-3基因的甲基化率分别为63.0％(58/92)和4.3％(4/92)，胃炎和健康人胃组织均没有检测到TIMP-3基因的甲基化。胃癌组织与癌旁正常组织、胃炎组织、健康人胃组织TIMP-3甲基化率均存在显著差异（均P＜0.01）。胃癌患者肿瘤组织TIMP-3甲基化与患者的临床分期、淋巴管侵犯、肿瘤大小、T分期、淋巴结转移、生长方式和分化程度显著相关（均P＜0.01）;与静脉侵犯也存在相关性（P=0.025）;与性别、年龄、远处转移、肿瘤位置（贲门与胃体胃窦）和HP感染无关（均P＞0.05）。肿瘤组织TIMP-3基因甲基化、临床分期、淋巴管侵犯、淋巴管侵犯、肿瘤大小、T分期、淋巴结转移、远处转移、生长方式和分化程度是胃癌患者预后的影响因素（均P＜0.05），而TIMP-3基因甲基化和远处转移是不良预后的独立预后因子（均P＜0.05）。92例胃癌患者术前血清和术前腹腔冲洗液中TIMP-3基因甲基化率分别为58.7％(54/92)和53.3％(49/92)。术前血清TIMP-3基因甲基化与患者临床分期、淋巴管侵犯、T分期、淋巴结转移、生长方式和分化程度存在显著相关性(均P＜0.01)，与肿瘤大小也相关（P=0.020），而与患者性别、年龄、静脉侵犯、远处转移、HP感染和肿瘤位置无关（均P＞0.05）。腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化与患者临床分期、淋巴管侵犯、T分期、淋巴结转移、生长方式、肿瘤大小和分化程度显著相关（均P＜0.01），与静脉侵犯和远处转移也存在相关性（P=0.022及P=0.029），与患者性别、年龄、肿瘤位置和HP感染无关（均P＞0.05）。术前血清和术前腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化与患者的无进展生存期相关(均P＜0.01)，同样可以作为患者无进展生存期的独立预后因子。术前血清和术前腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化状态与肿瘤组织甲基化状态的相关系数分别为0.963和0.927（均P＜0.01），ROC曲线下面积分别为0.966和0.922（均P＜0.01）。
结论:TIMP-3基因甲基化是胃癌发展过程中的高频事件，TIMP-3基因甲基化状态在一定程度上可以反映患者的进展状态和恶性程度。胃癌患者肿瘤组织、术前血清和腹腔冲洗液TIMP-3基因甲基化存在明显相关性，并且与胃癌患者无进展生存期存在显著相关性，都可以作为患者不良预后的独立预后因子。血清TIMP-3基因甲基化状态能更好的反映肿瘤的转移状态，为术前无创性检测提供新思路和方法。