酿酒酵母单倍体的分离及其发酵特性研究

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单倍体和二倍体酵母菌株在生产或科研中应用广泛,因此单、二倍体转化及鉴定研究对于生命科学研究及其生产应用都具有重大意义。诱导酵母产孢进而获得单倍体是进行酵母遗传学研究极其关键的一步,它既是遗传分析所必需,也可以为杂交育种提供材料来源。本研究进行酿酒酵母单倍体的分离筛选及其发酵特性研究,希望获得具有优良发酵特性的单倍体及极端表型单倍体,为后续QTL(Quantative Trait Loci,数量性状位基因座)定位提供优良的杂交材料。本研究主要得到以下结果:1.对12株酿酒酵母进行产孢观察,各菌株产孢率随时间呈整体上升趋势,至某一固定值后达到稳定。通过综合产孢率、产孢稳定时间、子囊类型与基因型4个因素,选取菌株 LFN520、44y7、112y4、112y14、174y1、31y3、31y10 与 33y7 进行单倍体分离。2.筛选得到极端产H2S表型单倍体34株,包括13株低产H2S单倍体;91株极端产气表型单倍体,包括79株低产气特性单倍体;29株为极端絮凝表型单倍体,包括22株高絮凝单倍体。3.单倍体33y7-43、44y7-1、31y3-33为极端高产甘油单倍体,甘油产量分别为7.63 g/L、8.19g/L、7.40g/L,174y1-3、174y1-5、174y1-6、174y1-27 为极端低产甘油单倍体,甘油产量分别为 4.33 g/L、4.60 g/L、4.55 g/L、4.71 g/L;33y7-43、112y4-45 为极端高产高级醇单倍体,其高级醇产量分别为11746.20 mg/L、986.88 mg/L,31 y3-33、44y7-1、174y1-5为极端低产高级醇表型单倍体,其高级醇产量分别为127.43mg/L、178.77 mg/L、151.65 mg/L;174y1-3、112y4-45为极端高产酯类表型单倍体,其酯类物质产量为 75.78 mg/L、42.90 mg/L,单倍体 31y3-33、112y4-46、44yy7-1、174y1-5 为极端低产酯类表型单倍体,其酯类物质产量为24.41 mg/L、27.75 mg/L、24.67 mg/L、27.69 mg/L。4.单倍体112y4-45、112y4-46、174y1-5具有优良的发酵特性,可作为后续杂交育种或遗传分析的优良材料;单倍体31y10-19、174y1-3,33y7-43、174y1-5是发酵特性完全极端的两对菌株,可进行杂交获得F2代单倍体。
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