DcR3、PTEN和PCNA在胃癌组织的表达及其临床意义

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前言胃癌是消化道常见的恶性肿瘤,在恶性肿瘤致死原因中占第二位。和其它肿瘤一样,胃癌也是一种多基因疾病,与一百多种基因及其蛋白产物密切相关。临床上约有60%的胃癌病人虽然经过有效的治疗,但最终死于复发和转移。研究认为,癌症的发生是细胞过度增殖和凋亡减少的过程。诱捕受体3(Decoy receptor3,DcR3)是新近发现的肿瘤坏死因子受体(Tumor Necrosis Factor Receptor,TNFR)家族的新成员,主要通过和某些蛋白配体特异性结合,竞争性地抑制配体与死亡受体的结合,从而阻断配体诱导的细胞凋亡。PTEN(Phosphatase and Tensin HomologDeleted on Chromosome 10)是第一个具有双特异性磷酸酶(Dual Specific-ityPhosphatase,DSP)活性的抑癌基因,该基因通过诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡等机制抑制肿瘤的发生和发展。增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)是DNA多聚酶的一种辅助蛋白,与细胞周期的S期增殖有关,作为一项评估细胞增殖状态的指标,并在细胞周期中起着重要的调控作用。本实验应用免疫组织化学方法,研究DcR3、PTEN和PCNA在胃癌组织中的表达,进一步探讨其在胃癌的发生、发展、浸润及转移中的作用,为其在肿瘤预防和临床诊断、治疗上提供新的依据。目的探讨人体胃癌组织DcR3、PTEN和PCNA的表达及其与胃癌生物学行为的关系;研究DcR3、PTEN和PCNA对胃癌细胞增殖和侵袭转移能力的影响;以及DcR3、PTEN和PCNA在肿瘤发生、细胞凋亡和增殖中的作用。为探索DcR3、PTEN和PCNA配体药物应用于胃癌的预防和临床治疗提供一些理论依据。实验材料(一)研究对象:选择临床及病理资料齐全的中国医科大学附属第二医院普通外科2001年~2003年手术切除并经病理证实为胃腺癌的蜡块标本54例,术前均未进行过化疗或放疗,病理均为腺癌。另取正常胃粘膜组织15例做对照,标本取自胃溃疡或十二指肠溃疡手术标本中正常胃粘膜组织,并经病理观察证实且排除重度不典型增生。(二)主要试剂:鼠抗人DcR3单克隆抗体购自美国NEOMARKERS公司,工作浓度1:200;鼠抗人PTEN单克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体均购自北京中山生物技术有限公司,PCNA工作浓度1:100;PTEN工作浓度1:100;超敏SP试剂盒和DAB显色剂均购自福州迈新生物技术有限公司。实验方法将蜡块HE染色,确定标本的组织分化程度。采用SP免疫组化方法检测DcR3、PTEN、PCNA在胃癌及正常胃组织中的表达。DcR3阳性细胞见于细胞浆显示淡黄色或棕黄色颗粒,PTEN以细胞浆呈棕黄色颗粒为阳性,PCNA以细胞核呈棕黄色为阳性,参考许良中及相关文献方法对染色结果进行分析。全部数据经SPSS13.0统计学软件处理。胃癌DcR3、PTEN和PCNA的表达状态与胃癌病理检查指标间的比较采用χ~2检验及Spearman等级相关分析作统计学分析,P<0.05为有统计学意义。结果1、DcR3在胃癌组织中的阳性表达率为42.6%,与胃癌的淋巴转移、临床分期及浸润深度、远隔转移、肿瘤大小呈正相关(P<0.05),与肿瘤的病理分化程度呈负相关(P<0.05)。2、PTEN在胃癌组织中的阳性表达率为50%,与胃癌的淋巴及远隔转移、肿瘤浸润深度、临床分期呈负相关(P<0.05);与肿瘤的病理分化程度呈正相关(P<0.05)。3、PCNA在胃癌组织中的阳性表达率为51.9%,与胃癌的淋巴及远隔转移、肿瘤浸润深度、肿瘤大小、临床分期呈正相关(P<0.05);与肿瘤的病理分化程度呈负相关(P<0.05)。4.Spearman等级相关分析显示,DCR3和PCNA表达呈正相关(r=0.755,P<0.001)。DCR3和PTEN表达呈负相关(r=-0.487,P<0.001),PCNA与PTEN表达呈负相关(r=0.371,P<0.006)。结论1、胃癌组织中DcR3与PTEN、PCNA的阳性率与肿瘤淋巴及远处转移、浸润深度、临床分期、肿瘤病理分化程度密切相关,提示它们在胃癌的发生发展和浸润转移过程中有抑制或促进作用。2、胃癌组织中DcR3与PTEN的表达呈负相关,提示其在胃癌的发生、发展以及浸润转移中存在着相互制约的作用。3、胃癌组织中DcR3与PCNA的表达呈正相关,提示其在胃癌的发生、发展以及浸润转移中存在着相互促进的作用。4.胃癌组织中PTEN与PCNA的表达呈负相关,提示其在胃癌的发生发展以及浸润转移中存在着相互抑制的作用。5.DcR3与PTEN、PCNA各自都可以成为胃癌诊断和判断预后的指标。
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