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应用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白是生物高新技术研究领域的热点。乳腺生物反应器研究从模式动物——小鼠的转基因开始,逐步建立起了大动物乳腺生物反应器制备的技术平台。以牛羊等反刍动物制备乳腺生物反应器的前景十分诱人。奶牛产奶量高,一旦得到高表达的个体,其产量和效益十分可观。但奶牛作为单胎动物,生产周期长、成本高。目前利用转基因羊制备乳腺生物反应器有一些成功的例子。奶山羊泌乳期长,单何产奶量高,相对成本低,在乳腺生物反应器的制备方面极具应用价值,以此为基础将推动奶牛泌乳与乳腺生物反应器研究的不断深入。体外培养的奶山羊乳腺上皮细胞在乳腺生长发育和泌乳机制的研究及乳腺生物反应器的应用等方面具有重要作用。目前建立的一些奶山羊乳腺上皮细胞系往往丧失了泌乳功能,不适合作为研究泌乳机制及检测乳腺表达载体的细胞模型。因此有必要对奶山羊乳腺上皮细胞的体外培养、激素与乳腺上皮细胞分泌功能的关系等方面进行深入研究,以探索建立奶山羊乳腺生物反应器细胞模型的有效方法。本研究选用泌乳性能好的关中奶山羊作为实验材料。利用酶消化法获得了奶山羊乳腺上皮细胞,对纯化的乳腺上皮细胞进行了鉴定。通过细胞培养体系的确立及生物学形状的检测建立并鉴定了奶山羊乳腺上皮细胞系。此外,SDS-PAGE、甘油三酯生化测定及HPLC法对乳蛋白、乳脂和乳糖的测定反映了激素对乳腺上皮细胞泌乳功能的影响。从而为奶山羊乳腺生物反应器细胞模型的建立及奶山羊乳腺发育利泌乳机制的研究提供实验依据。实验结果表明,本研究获得了纯化的奶山羊乳腺上皮细胞,建立并鉴定了奶山羊乳腺上皮细胞系。通过细胞传代及反复冻存和复苏实现了细胞系的长期保存,获得了大量的乳腺上皮细胞。奶山羊乳腺上皮细胞在添加生长因子的培养液中生长增殖状态良好,细胞传至30代时仍保持旺盛的增殖活力。胰岛素对体外培养的奶山羊乳腺上皮细胞的泌乳功能无显著影响,而催乳素对于体外培养的奶山羊乳腺上皮细胞则具有诱导乳蛋白、乳糖分泌的作用。