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1研究目的为保证临床用药的安全性、有效性、稳定性,必须对其品质进行科学的鉴定、制订出规范化的质量标准。本文采用多指标控制质量的方法,即对处方中每个药都建立一个含量测定指标的方法,建立黄金菊含片和胶囊的质量标准;从质量标准反映临床疗效的角度出发,探讨用生物效应鉴定法控制黄金菊粉针剂质量的方法。2研究内容与方法2.1建立黄金菊含片、胶囊质量标准2.1.1黄金菊含片、胶囊成型工艺研究在本课题组对黄金菊粉针提取工艺研究的基础上,应用其已经干燥的水提取物,完成黄金菊系列制剂中含片和胶囊的制剂成型工艺。为质量标准制定作准备。通过制粒和压片结果确定黄金菊含片制粒的辅料比例和乙醇浓度比例,确定矫味剂的添加比例;通过制粒结果确定黄金菊胶囊制粒的辅料比例和乙醇浓度比例。2.1.2黄金菊含片、胶囊的质量标准研究建立HPLC法对黄金菊含片、胶囊中的荭草苷、黄芩苷、绿原酸的含量进行测定。2.2黄金菊制剂的生物效应鉴定法探讨2.2.1进行黄金菊胶囊的药效学研究为黄金菊胶囊进一步建立生物鉴定方法提供思路。其内容包括:抗炎试验;镇痛试验;镇咳试验;解热试验;抗菌试验2.2.2黄金菊粉针生物效应鉴定法探讨因黄金菊粉针为黄金菊制剂课题的主要研究对象,其精制工艺使得其在所有黄金菊制剂中可知成分含有量最高,并且无辅料干扰,鉴于此原因,以黄金菊粉针为载体进行体外抗病毒效应鉴定法研究。采用体外细胞培养技术、CPE法建立黄金菊粉针抗腺病毒3型(Ad3)效应方法;采用鸡胚法、建立黄金菊粉针抗呼吸道流感病毒PR8株的效应方法。3研究结果3.1建立了黄金菊含片、胶囊质量标准3.1.1完成了黄金菊含片和胶囊的成型工艺研究3.1.2完成了黄金菊含片和胶囊的质量标准研究3.1.2.1含片的质量标准研究结果荭草苷的含量测定:用ODS2 C18 4.6×250mm、5μm色谱柱,0.1%磷酸水-乙睛(83:17)为流动相,检测波长为345nm,荭草苷的回收率为99.97%,RSD=0.8217 %平均含量为0.26518%。黄芩苷的含量测定:用ODS2 C18 4.6×250mm、5μm色谱柱,0.055%磷酸水-甲醇-四氢呋喃(53.9:38.2:7.9)为流动相,检测波长为280nm,黄芩苷的回收率为98.98%,RSD=1.3044 %平均含量为4.15%。绿原酸的含量测定:用ODS2 C18 4.6×250mm、5μm色谱柱,0.4%磷酸水-乙睛(89:11)为流动相,检测波长为327nm,绿原酸的回收率为95.97%,RSD=1.06 %平均含量为0.3947%。3.1.2.2胶囊的质量标准研究结果荭草苷的含量测定:用ODS2 C18 4.6×250mm、5μm色谱柱,0.1%磷酸水-乙睛(83:17)为流动相,检测波长为345nm,荭草苷的回收率为100.87%,RSD=1.4746 %平均含量为0.53026%。黄芩苷的含量测定:用ODS2 C18 4.6×250mm、5μm色谱柱,0.055%磷酸水-甲醇-四氢呋喃(53.9:38.2:7.9)为流动相,检测波长为280nm,黄芩苷的回收率为100.44%,RSD=0.5389 %平均含量为8.66%。绿原酸的含量测定:用ODS2 C18 4.6×250mm、5μm色谱柱,0.4%磷酸水-乙睛(9:11)为流动相,检测波长为327nm,绿原酸的回收率为100.44%,RSD=2.94 %平均含量为0.7997%。3.2黄金菊粉针生物效应鉴定法探讨3.2.1黄金菊胶囊的药效学研究结果试验结果提示黄金菊胶囊具有抗炎、镇痛、镇咳、解热及抗菌等药理作用。可以进一步做探讨建立其生物鉴定方法的研究。3.2.2黄金菊粉针生物效应鉴定方法学研究结果通过考察黄金菊粉针抗人腺病3型和流感病毒PR8型的效应,建立了黄金菊粉针的体外抗病毒效应的质量标准。黄金菊粉针对人Ad3的最小有效浓度为25mg/mL。黄金菊粉针对流感病毒PR8株的最小有效浓度为6.25mg/mL。对hela细胞的最大无毒浓度是100mg/mL。对鸡胚的最大无毒浓度是100mg/mL。4结论4.1筛选出了黄金菊含片和胶囊的最佳成型制备工艺。为进一步的成品质量标准制定做好准备。4.2采用部分药效组分作为黄金菊含片、胶囊的含量测定指标,规定了其中主要成分荭草苷、绿原酸、黄芩苷的含量指标和含量测定方法,可保证成品的质量稳定可控。4.3明确了黄金菊粉针的抗Ad3和流感病毒PR8株病毒的最小有效浓度和最大无毒浓度。为黄金菊粉针的体外安全性鉴定提供依据。4.4黄金菊粉针的质量可采用生物效应的方法进行评价,即用黄金菊粉针的体外抗人Ad3和流感病毒PR8株的作用评价药物的质量标准,为黄金菊粉针的体外有效性鉴定提供依据。为生物评价中药提供了依据,为全面测评中药的疗效提供了方向。