60Co-γ辐射诱变库尔勒香梨枝条的生长发育特性观测及SRAP分子标记检测

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本文利用60Co-γ辐射诱变技术和SRAP分子标记辅助检测技术相结合的方法,探讨创造库尔勒香梨新品种的方法。通过观测60Co-γ辐射处理的香梨休眠枝与萌动枝的萌发率,物候期,枝、叶、果的生长发育特性,以及果实品质和营养成分对比,借助SRAP分子标记技术,从分子水平比较了辐射诱变效应的差异性。主要结果如下:1.2013年观测库尔勒香梨辐射处理的枝芽萌发率比2012年有所提高;辐射处理枝的香梨果实成熟期比对照提前了一周左右;40Gy的辐射处理能显著提高辐射萌动枝的花序、花朵坐果率;辐射对枝、叶的生长仍然有抑制作用,对果实生长的影响没有太大差异。树体在30-40Gy的辐射剂量范围内有较强的适应性。2.部分辐射处理枝所结果实的品质有不同程度提高:果形整齐度高,果实硬度降低,商品性增强;辐射剂量为20Gy时,处理的两类枝条所结果实的石细胞、可溶性糖和可溶性固形物含量差异不显著;剂量为30Gy时,休眠枝果实含水量最高,果实的可食率和脱萼率也有提高,萌动枝果实石细胞含量最高,果实的Vc和可滴定酸含量显著高于休眠枝;40Gy辐射处理的萌动枝果实石细胞含量最少,可溶性糖含量高,富含维生素C,果味较甜。综合比较认为40Gy处理的萌动枝所结果实品质最好。3.果实中营养元素的含量因辐射剂量和枝条类型的不同而有差异,40Gy辐射处理的萌动枝果实中Ca、Fe、Mn含量高,30Gy休眠枝果实中Cu含量高,20Gy休眠枝果实中Mg含量高,20-30Gy的辐射剂量有助于提高果实中Zn含量。4. SRAP分子标记辅助检测技术初步确定的SRAP-PCR最佳反应体系为20μL,主要是1×PCR Buffer、0.50μmol/L引物、0.02mmol/L dNTPs、0.04U Taq DNA聚合酶、50ng/μL模板DNA、和14.25μL ddH2O。本次试验总共筛选出4对条带清晰、重复性好、有差异的引物组合,共扩增出58条清晰的条带,多态性条带占总条带数的32.76%。5.从分子水平上比较两类枝条辐射诱变效应的差异,结果表明,随着辐射剂量的增加,休眠枝与对照的差异性也随着增大,在30Gy辐射剂量处达到最大;辐射剂量继续增大,差异反而减小;萌动枝的变化不呈现一定的规律性。
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