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为探究不同氨基酸及组合对氨基酸转运载体、葡萄糖转运载体及胰岛素通路相关信号蛋白的影响,本试验通过在饲喂奶牛的日粮中添加四种必须氨基酸(Met、Thr、Ile及Leu)及其组合,进而检测乳腺组织中氨基酸转运载体、葡萄糖转运载体及胰岛素通路相关信号蛋白的的mRNA表达量及蛋白表达量。10只泌乳期荷斯坦奶牛采用5×5重复拉丁方设计,日粮蛋白水平为16%(PC组)和12.7%(NC组),低蛋白日粮添加过瘤胃氨基酸,氨基酸添加量分别为0、Met(5g/d)(M组)、Met+Thr(16.1g/d)(MT组)和Met+Thr+Ile(18g/d)+Leu(30.9g/d)(MTIL组)。结果显示:(1)本试验的不同处理对氨基酸转运载体LAT1、SNAT3、y~+LAT1、ASCT1、ASCT2的mRNA表达量均有显著影响(P<0.05),对LAT2、SNAT2的mRNA表达量的影响不显著(P>0.05)。与NC组相比,PC组的AATs的mRNA表达差异均不显著(P>0.05),M组的LAT1,LAT2,SNAT2,SNAT3,ASCT1,ASCT2表达量下降(P<0.05),MT组的有下降趋势(P<0.1);相对于M和MT组,MTIL组的表达量上升或有上升的趋势(P<0.1)。对于y~+LAT1来说,相对于NC组,M和MT组的表达量显著上升(P<0.05),相对于M和MT组,MTIL组的表达量显著下降(P<0.05)。试验处理对氨基酸转运载体LAT1、ASCT1、SNAT2的蛋白表达量均有显著影响(P<0.05)。同NC组相比,PC组的LAT1的蛋白表达量显著降低(P<0.05),MTIL组的LAT1的蛋白表达量显著升高(P<0.05)。同NC组相比,MTIL组的ASCT1的蛋白表达量显著升高(P<0.05),同M组相比,MT组的ASCT1的蛋白表达量显著降低(P<0.05),MTIL组的显著上升(P<0.05);同MT组相比,MTIL组的ASCT1的蛋白表达量显著上升(P<0.05)。同NC组相比,MTIL组的SNAT2的蛋白表达量显著上升(P<0.05),同M组相比,MTIL组的显著上升(P<0.05);同MT组相比,MTIL组的SNAT2的蛋白表达量显著上升(P<0.05)(2)试验处理对葡萄糖转运载体中的GLUT1的mRNA的表达量影响较为显著(P<0.05),对GLUT3和GLUT8的mRNA的表达量的影响有显著趋势(P<0.1)。同NC组相比,PC组、M和MT组的GLUT1的mRNA表达量均显著降低(P<0.05);相对于MT组,MTIL组的表达量上升(P<0.05)。试验处理对GLUT1和GLUT3的蛋白表达量有显著影响(P<0.05)。同NC组相比,PC组的GLUT1的蛋白表达量无显著差异(P>0.05),M组与MT组的表达量均显著降低(P<0.05);同NC组相比,PC组的GLUT3的蛋白表达量无显著差异(P>0.05),MT组的表达量显著降低(P<0.05)(3)试验处理对胰岛素途径中的AKT1的mRNA表达有显著影响(P<0.05),对IRS1的表达有显著趋势(P<0.1),试验处理对INSR的表达影响不显著(P>0.1)。对AKT1来说,相对于NC组,M和MT组的表达量显著降低(P<0.05);相对于MT组,MTIL组的表达量显著上升(P<0.05)。试验处理对INSR的蛋白表达量有显著影响(P<0.05),同NC组相比,PC组与MT组的INSR的蛋白表达量显著降低(P<0.05);同M组相比,MT组的表达量显著降低(P<0.05)。结论:日粮中添加过瘤胃氨基酸能够通过影响氨基酸转运载体、葡萄糖转运载体表达量的变化及胰岛素信号通路进而调节乳腺功能。