研究背景:胰腺癌是一种恶性程度极高的消化道肿瘤,其发病机制一直以来都没有完全阐明,严重影响了胰腺癌诊断和治疗的发展,因此研究胰腺癌发生发展的分子机制对于改善胰腺癌患者的诊断和预后意义重大。CRNDE作为一种长链非编码RNA,在多种恶性肿瘤中高表达,与癌症的发生发展密切相关。然而,CRNDE在胰腺癌中的调控机制尚不清楚。课题组以往研究证实CRNDE可以调控Hippo通路的活化过程,介导胰腺癌的发生发展,但其具体的调控机制仍不明确。研究发现在非小细胞肺癌中,METTL3可以通过调控MALAT1上调YAP蛋白表达,从而诱导肿瘤耐药和恶性转移。我们推测在胰腺癌中,METTL3可能通过类似途径,也就是通过调控CRNDE的表达间接调控Hippo通路,从而介导肿瘤的发生发展。研究目的:本研究围绕METTL3调控CRNDE甲基化介导Hippo通路在胰腺癌中作用及机制进行研究,旨在阐明METTL3是否通过CRNDE的甲基化修饰机制影响Hippo通路,促进胰腺癌的发生发展。研究方法:本研究首先检测了METTL3在胰腺癌组织和细胞中的表达情况;接着,通过CCK8、流式细胞术、Transwell等细胞离体实验研究METTL3对胰腺癌细胞增殖能力、凋亡水平和侵袭能力等细胞恶性生物学行为的影响;最后通过实时定量RT-PCR技术、蛋白免疫印迹实验研究METTL3和CRNDE之间的调控作用,以及METTL3表达水平对Hippo通路途径中核心分子表达水平的影响。研究结果:本研究发现METTL3在胰腺癌组织和胰腺癌细胞中高表达;接着我们通过细胞离体实验证实METTL3可以促进胰腺癌细胞的增殖、侵袭并抑制肿瘤细胞的凋亡;随后,我们发现METTL3对CRNDE具有调控作用;最后,我们将siRNA-METTL3转染到胰腺癌细胞中,结果表明METTL3表达下调后,Hippo通路中的主要下游效应分子YAP/TAZ的表达量显著降低,说明METTL3能够抑制Hippo通路的活化。研究结论:本文初步证实了METTL3在胰腺癌发生发展中发挥的重要作用,METTL3通过CRNDE的甲基化修饰机制影响Hippo通路。